Proceeding2562

1100 การประชุมวิชาการระดับชาติมหาวิทยาลัยทักษิณ ครั้งที่ 29 ประจ�ำปี 2562 วิจัยและนวัตกรรมเพื่อการพัฒนาที่ยั่งยืน แพร่กระจายมากนักในแมวที่นามารักษาที่โรงพยาบาลสัตว์แห่งนี้ แต่อย่างไรก็ตาม การดื้อยาปฏิชีวนะของเชื้อแบคทีเรียกลุ่ม Multidrug-Resistant-Staphylococcus และเชื้ออื่นๆ ที่เพาะแยกได้จากแมวซึ่งดื้อต่อยากลุ่ม β -lactams ยังเป็นประเด็นที่น่า กังวลในด้านสุขภาพสัตว์และสาธารณสุข [5] การใช้ยาปฏิชีวนะกลุ่ม Macrolide-Lincosamide-Streptogramin B (MLSB) เป็นทางเลือกหนึ่งเพื่อรักษาการติดเชื้อ S. aureus โดยการดื้อยาปฏิชีวนะกลุ่ม Macrolides สามารถมี erm gene เป็นสื่อกลาง ทาให้เกิดการดื้อยาปฏิชีวนะแบบ inducible หรือ constitutive resistance ต่อยาปฏิชีวนะกลุ่ม MLSB [6] ซึ่งไม่สามารถใช้การทดสอบความไวต่อยาปฏิชีวนะที่ ใช้เป็นปกติในห้องปฏิบัติการเพื่อทดสอบเชื้อที่มี Inducible clindamycin resistance (iCR) ได้ จึงต้องมีการทดสอบที่เรียกว่า D test หรือ Double disc diffusion test เพื่อทดสอบหาความไวของเชื้อแบคทีเรียต่อยา clindamycin [7] โดยเชื้อแบคทีเรียที่มี iCR จะให้ผลดื้อยา erythromycin และไวต่อยา clindamycin ในการทดสอบความไวยาที่ใช้ปกติในห้องปฏิบัติการ [8] ในการ ทดลองในสิ่งมีชีวิต เชื้อแบคทีเรียที่มี iCR จะทาให้มีผลต่อการเลือกยาปฏิชีวนะเพื่อรักษา ซึ่งหากเลือกยาไม่เหมาะสม อาจนาไปสู่ ความล้มเหลวในรักษาได้ ดังนั้นความถูกต้องของข้อมูลความไวต่อยาปฏิชีวนะของเชื้อแบคทีเรียจึงมีความสาคัญมากในการ เลือกใช้ยาปฏิชีวนะที่เหมาะสม [6] วัตถุประสงค์ของการศึกษานี้ เพื่อศึกษาความไวและการดื้อยาปฏิชีวนะของเชื้อแบคทีเรียก่อโรคในสัตว์ ได้แก่ Staphylococcus aureus, Staphylococcus intermedius, Staphylococcus hyicus , Streptococcus spp., Escherichia coli , Klebsiella spp. และ Pseudomonas spp. ต่อยาปฏิชีวนะ 14 ชนิด และตรวจหาเชื้อ MRSA ด้วย Disc diffusion test และยืนยันผลด้วยเทคนิคพีซีอาร์ และอะกาโรสเจลอีเลคโตรโฟรีซีส นอกจากนี้ศึกษาผลของ Inducible clindamycin resistance (iCR) ด้วย D test จากตัวอย่างเชื้อที่แยกได้จากสัตว์ เพื่อเป็นข้อมูลพื้นฐานสาหรับการเลือกใช้ยาในการรักษาโรคที่ เกิดจากเชื้อแบคทีเรียต่อไป วิธีดาเนินการ การเก็บตัวอย่าง และ การเพาะเเยกเชื้อ เก็บตัวอย่างจากสัตว์ที่ป่วยด้วยโรคต่างๆเช่นโรคเต้านมอักเสบและช่องหูอักเสบ เป็นต้น เพาะ แยกเชื้อแบคทีเรียบน Blood agar และ Macconkey agar และจาแนกชนิดของแบคทีเรียโดยทาการทดสอบปฏิกิริยาทางเคมีเพื่อเเยกเเละระบุชนิด ของเชื้อเเบคทีเรีย จากการเพาะแยกพบเชื้อแบคทีเรียกลุ่ม Staphylococcus aureus จานวน 15 ตัวอย่าง กลุ่ม S t a p h y l o c o c c u s i n t e r m e d i u s 1 ตั ว อ ย่ า ง ก ลุ่ ม S t a p h y l o c o c c u s h a y i c u s 1 ตั ว อ ย่ า ง กลุ่ม Streptococcus spp. 6 ตัวอย่าง กลุ่ม Escherichia coli 2 ตัวอย่าง กลุ่ม Klebsiella spp. 3 ตัวอย่าง และ กลุ่ม Pseudomonas spp. 1 ตัวอย่าง จากนั้นนาเชื้อมาเก็บในอาหารเลี้ยงเชื้อเหลวที่อุณหภูมิ -20 องศาเซลเซียส เพื่อรอการ ทดสอบ การทดสอบความไวยา การเตรียมเชื้อ เพาะเชื้อบน Blood agar อายุ 1 วัน แล้วนาเชื้อมาเพาะเลี้ยงบน Mueller-Hinton broth เป็นเวลา 2-3 ชั่วโมง จากนั้นเตรียมเชื้อด้วยเครื่องวัดความขุ่นให้มีความขุ่นเทียบเท่า 0.5 McFarland standards นามาเจือจาง 100 เท่า สุดท้ายจะได้ ปริมาณเชื้อ 10 6 CFU/ml [9]