Proceeding2562

1565 การประชุมวิชาการระดับชาติมหาวิทยาลัยทักษิณ ครั้งที่ 29 ประจ�ำปี 2562 วิจัยและนวัตกรรมเพื่อการพัฒนาที่ยั่งยืน การพัฒนาวิธี Enzyme-linked immunosorbent assay เพื่อตรวจหาแอนติบอดีต่อโปรตีน p16 INK4a ในตัวอย่างซีรัมของผู้หญิงที่มีรอยโรคบริเวณปากมดลูก ปิยะวุฒิ แสวงผล 1* ลลิตา มั่นสัมฤทธิ์ 2 สุธัญญา ถนัดอักษร 2 ศศิภา จันทร์สุข 2 และชญานิษฐ์ หนูสันทัด 2 บทคัดย่อ บทน�ำ : การติดเชื้อไวรัสฮิวแมนปาปิลโลมาชนิดความเสี่ยงสูง (high-risk HPV) เป็นสาเหตุหลักของการพัฒนาเป็นมะเร็งปากมดลูก การเพิ่มขึ้นของโปรตีน p16 INK4a ซึ่งเป็นโปรตีนของเซลล์ในกลุ่มโปรตีนต้านมะเร็ง ในเซลล์ผิดปกติที่ติดเชื้อ HPV ได้น�ำมาใช้เป็นตัว บ่งชี้การพัฒนาไปเป็นมะเร็ง การตอบสนองทางภูมิคุ้มต่อโปรตีน p16 INK4a สามารถพบได้ในผู้ป่วยรอยโรคบริเวณปากมดลูกระดับ รุนแรง การพัฒนาตรวจหาแอนติบอดีต่อโปรตีน p16 INK4a ที่ความไวสูงและสามารถท�ำการตรวจได้หลายตัวอย่างในเวลาเดียว เช่น ELISA จึงมีประโยชน์ในการตรวจกรองมะเร็งปากมดลูก วัตถุประสงค์ : เพื่อพัฒนาการตรวจหาแอนติบอดีต่อโปรตีน p16 INK4a ด้วยวิธี ELISA ในตัวอย่างซีรัมจากผู้หญิงที่มีรอยโรคบริเวณ ปากมดลูก วิธีการศึกษา : โปรตีน p16 INK4a จะถูกผลิตในเซลล์ Escherichia coli BL21 ในพลาสมิด pTrcHisA และจะถูกท�ำให้บริสุทธิ์ด้วย นิกเกิลคอลัมน์ โปรตีนที่ผลิตได้น�ำมาใช้ตรวจหาแอนติบอดีต่อโปรตีน p16 INK4a ด้วยวิธี ELISA กับตัวอย่างซีรัมจากผู้หญิงที่มีรอยโรค บริเวณปากมดลูกจ�ำนวน 97 ราย ที่ผ่านการตรวจหาแอนติบอดีต่อโปรตีน p16 INK4a ด้วยวิธี Western blot ที่ให้ผลบวก 50 ราย และผลลบ 47 ราย ค่าตัดผลบวกจะถูกค�ำนวณจากตัวอย่างที่ให้ผลลบ 4 ตัวอย่าง น�ำมารวมกันแล้วท�ำการตรวจวัด 31 ซ�้ำ ผลการศึกษา : การค�ำนวณค่าตัดผลบวกในการตรวจหาแอนติบอดีต่อโปรตีน p16 INK4a ได้ค่าเท่ากับ 0.908 (OD 450 ) ความไวและ ความจ�ำเพาะต่อการตรวจได้เท่ากับ 94.0% และ 82.97% ตามล�ำดับ วิจารณ์และสรุป : การตรวจ ELISA ครั้งนี้พบว่า ให้ความไวและความจ�ำเพาะที่สูง เหมาะสมกับการตรวจหาแอนติบอดีต่อโปรตีน p16 INK4a มากกว่าวิธี Western blot อย่างไรก็ตาม การตรวจ ELISA ครั้งนี้ยังต้องท�ำการทดสอบเพื่อให้ได้สภาวะที่เหมาะสม และให้ได้ความไวและความจ�ำเพาะที่มากขึ้นต่อไป ค�ำส�ำคัญ: ฮิวแมนปาปิลโลมาไวรัส, โปรตีน p16 INK4a , Enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) , รอยโรคบริเวณปากมดลูก 1 อาจารย์, คณะเทคนิคการแพทย์ มหาวิทยาลัยสงขลานครินทร์ วิทยาเขตหาดใหญ่ หาดใหญ่ สงขลา 90112 2 นักศึกษาเทคนิคการแพทย์, คณะเทคนิคการแพทย์ มหาวิทยาลัยสงขลานครินทร์ วิทยาเขตหาดใหญ่ หาดใหญ่ สงขลา 90112 1 Lecture, Faculty of Medical Technology, Prince of Sonkla University, Hat Yai campus, Songkhla 90112 2 Medical Technology student, Faculty of Medical Technology, Prince of Sonkla, University, Hat Yai campus, Songkhla 90112 * Corresponding author: Tel: 074-289122, E-mail address: piyawut.s@psu.ac.th