วารสารเทคโนโลยีและนวัตกรรมเกษตร ปีที่ 1 ฉบับที่ 1

Journal of Technology and Agricultural Innovation Vol. 1 No. 1 (January - June 2023) 12 ผลของคาร์์บอนไดออกไซด์ต่่อกา เจริิญและพััฒนาของเน้�อเยื่่�ออนูเบี สบาร์์เทอรีี ที�เ าะเลี� งใน ะบบ... วัสดุ อุุปกรณ์และวิธีีดำ�เนินการ การเตรี มพืชท ลอง การศึกษานี�ใช้้ช�นส่วนเนื�อเยื่�ออนูเบีี ส าร์เทอรี สายพัันธุ์์�บาร์เทอรี (barteri) ที�ทำ�การเพาะเลี� งเป็็นระ ะเวลา 4 สั าห์ นอาหารก่�งแข็็งสูตร MS ไม่ได้้เติมสารควบคุุมการเจริิญเติ โต (plant growth regulators; PGRs) เติม นำ��ตาล 30 ก./ล. และผงวุ�น 8 ก./ล. เป็็นส่วน ระกอ การเตรี มชุ ไ โอรีแอคเตอร์ มชั�วคราวแ เติม CO 2 ทำ�การพั นาชุ ไ โอรีแรคเตอร์ มชั�วคราว (temporary immersion bioreactor, TIB) แ เติม CO 2 โ มีส่วน ระกอ 2 ส่วน คือ ส่วนที� 1 ชุ ไ โอรีแอคเตอร์เป็็นระ มชั�วคราว ที� ระกอ ด้้ว ว นา 500 มล. จำำ�นวน 2 ว โดยที่่� วดที่� 1 ใส่อาหารเหลวสูตร MS ที�เติม BA 2 มก./ล. และ วดที่� 2 รรจุุชิ�นส่วนเนื�อเยื่�ออนูเบีี ส าร์เทอรี สำ�หรับส่่วนที� 2 เป็็นชุ่ ายก๊๊า CO 2 ากการทำ ฏิิกิริ าเคมีระหว่างกริ ตริก (citric acid) กั โ เดีี มไ คาร์ อเนต (sodium carbonate: NaHCO 3 ) (รููปภาพที� 1) รู ภา ที่ 1. เครื่องต้นแ ไ โอรีแอคเตอร์ มชั่วคราว (temporary immersion bioreactor; TIB) ที่มีชุ ผลิต CO 2 (CO 2 generator) โ หลักการทำ�งาน องชุ TIB แ เติม CO 2 ระกอ ด้้ว 6 ขั้�นตอน ดัังนี� คือ ขั้�นตอนที� 1 เป็็นการเตรี ม เนื�อเยื่�อและอาหารเหลวในแต่ละ ว ขั้�นตอนที� 2 ปั๊�มลม ะทำ�หน้าที�เป่่าลมผ่านตัวกรองเข้้าไ ใน วดที่�มีอาหารเหลว เพาะเลี� งแล้วดัันอาหารเหลวในไหลเข้้าไ ใน วดที่�มีเนื�อเยื่�อพืช โ ใช้ระ ะเวลา 30 วินาที ขั้�นตอนที� 3 เนื�อเยื่�อพืช ะ แช่อยู่่ในอาหารเหลว เป็็นเวลา 30 วินาที ขั้�นตอนที� 4 หลัง ากนั�นปั๊�มลม ะเป่่าลมผ่านตัวกรองเข้้าไ ใน ว เนื�อเยื่�อพืช ที�มีอาหารเหลวอยู่่ให้ไหลกลั ไั ง ว อาหารเป็็นระ ะเวลา 30 วินาที ขั้�นตอนที� 5 ชุ่ า CO 2 ทำ�การปล่่อยก๊๊า CO 2 ความเข้้มข้้น 500 พีพีเอ็ม เข้้าไ ใน ว เนื�อเยื่�อ เป็็นระ ะเวลา 3 นาที และขั้�นตอนที� 6 ปล่่อ ให้้ช�นส่วนเนื�อเยื่�อพืชอยู่่ ใน ว เป็็นเวลา 180 นาที หลัง ากนั�นจึึงวนกลั มาเริ�มในขั้�นตอนที� 1 ใหม่ (รููปภาพที� 2ก) ภาพลักษณะ องการ ล่ อ ก๊า CO 2 ผ่านตัวกรองเข้้าไั งใน วดที่�มีชิ�นส่วนเนื�อเยื่�อพืชแส งดััง รููปภาพที� 2 โ การเพาะเลี� งเนื�อเยื่�ออนูเบีี ส าร์ เทอรีในชุ ไ โอรีแอคเตอร์ มชั�วคราว ะมีการให้อาหาร 8 ครั�งต่อวัน