วารสารเทคโนโลยีและนวัตกรรมเกษตร ปีที่ 2 ฉบับที่ 1

Tissue culture of Thalassia hemprichii (Ehrenberg) Ascheron ระเบียบวิธีวิจัย 1. สารเคมีที่ใช้ในการทดลอง สารเคมีที่ใช้เป็นองค์ประกอบสูตรอาหาร MS ( Murashige and Skoog, 1962 ) 1.1 สารอนินทรีย์ 1.1.1 ธาตุอาหารหลัก ได้แก่ ไนโตรเจน ฟอสฟอรัส โปแตสเซียม แคลเซียม แมกนีเซียม และซัลเฟอร์ 1.1.2 ธาตุอาหารรอง ได้แก่ เหล็ก คลอรีน แมงกานิส ทองแดง สังกะสีโบรอนและโบลิดินัม เป็นต้น 1.2 สารอินทรีย์ ได้แก่ แหล่งคาร์บอน น้ำตาล กรดอะมิโน ผงถ่าน วิตามินบี 1 และวิตามินบี 6 เป็นต้น 1.3 สารเคมีที่ใช้ในการฟอกฆ่าเชื้อและทำความสะอาด ได้แก่ แอลกอฮอล์ความเข้มข้น 70 เปอร์เซ็นต์ ทวีน 20 1.4 ผงวุ้น น้ำตาลซูโครส ซอร์บิทอล แมนนิทอล และโพลีเอทธิลีนไกลคอล 1.5 สารควบคุมการเจริญเติบโต ประกอบด้วย NAA และ BA 1.6 น้ำยาฟอกขาวไฮเตอร์ประกอบด้วย Sodium Hypochlorite as available Chlorine 6 % w/w 2. อุปกรณ์การทดลอง 2.1 เครื่องแก้ว ประกอบด้วย ขวดแก้ว กระบอกตวง ปิเปต บิกเกอร์ จานเพาะเลี้ยง ขวดปรับปริมาตร ขวดเพาะเลี้ยง และขวดรูปชมพู่ 2.2 อุปกรณ์ในการเตรียมอาหาร ประกอบด้วย เครื่องชั่งทศนิยม 2 และ 4 ตำแหน่ง เครื่องวัด pH เครื่องคน สารละลาย แท่งแม่เหล็ก ตู้อบแห้ง ตู้อบฆ่าเชื้อ หม้อนึ่งฆ่าเชื้อ ตู้อบ ไมโครเวฟ และตู้เย็น 2.3 อุปกรณ์ในการเตรียมวัสดุพืช ประกอบด้วย กรรไกร ถุงพลาสติกใส 2.4 อุปกรณ์ในการย้ายเลี้ยง ประกอบด้วย ตู้ย้ายเลี้ยง ถังแก๊ส แอลกอฮอล์ ความเข้มข้น 95 เปอร์เซ็นต์ ผ้าเช็ดตู้ ปากคีบ มีดผ่าตัดพร้อมใบมีด 2.5 กล้องถ่ายรูปดิจิตอล 3. วิธีการทดลอง 3.1 วิธีการเก็บตัวอย่าง เก็บตัวอย่างและรวบรวมหญ้าชะเงาเต่า (Thalassia hemprichii) จากบริเวณหาดมดตะนอยตำบลเกาะลิบง อำเภอกันตัง จังหวัดตรัง ขณะน้ำลงโดยนำต้นหญ้าชะเงาเต่า นำมาล้างทำความสะอาดให้ปราศจากทรายและดินตะกอน แล้วนำมาห่อกระดาษบรรจุในถุงซิป และแช่เย็นเพื่อรักษาสภาพตัวอย่างก่อนนำมาใช้ในการศึกษา เตรียมตัวอย่าง ฟอกฆ่าเชื้อที่ผิว โดยนำชิ้นส่วนใบ โคนใบและลำต้นใต้ดินของหญ้าชะเงาเต่า ไปล้างผ่านน้ำประปา เป็นเวลา 1 นาทีใช้พู่กัน ปัดทำความสะอาด แล้วแช่ในเอธิลแอลกอฮอล์ 70 เปอร์เซ็นต์ เป็นเวลา 30 วินาที ล้างด้วยน้ำทะเลฆ่าเชื้อ 3 ครั้ง น้ำทะเล ฆ่าเชื้อที่ใช้ตลอดการทดลองมีความเค็ม 28 psu รูปภาพที่ 1. หญ้าชะเงาเต่า Thalassia hemprichii ที่มา : กรมทรัพยากรทางทะเลและชายฝั่ง (2565)