full2012.pdf - page 61

°»ž„¦–r ¨³ª·›¸„µ¦
แบ่งการศึ กษาออกเป็ น 2 การทดลอง คือ การทดลองที่ 1 เพาะขยายกล้าเชื้อแบคที เรี ยดี ไนตริ ไฟอิงด้ วยระบบ
การเพาะเลี้ยงแบบกึ่งกะ (Semi-batch) และ การทดลองที่ 2 ศึกษาสภาวะที่ เหมาะสมในการบําบัดไนเตรทโดย RSM ดัง
มีรายละเอียดต่อไปนี้
„µ¦Á¡µ³ ¥µ¥„¨oµÁºÊ°Â‡š¸ Á¦¸¥—¸Åœ˜¦·Å¢°·Š—o ª¥¦³„µ¦Á¡µ³Á¨¸Ê ¥ŠÂ„¹ÉŠ„³
เก็บรวบรวมกล้าเชื้ อแบคทีเรี ยดี ไนตริ ไฟอิง มาจากระบบบําบัดนํ้ าเสี ยแบบตะกอนเร่ งของโรงงานแปรรู ป
อาหารทะเลในจังหวัดสงขลา จากระบบกรองชี วภาพของการเพาะเลี้ ยงปลากะพงขาวในนํ้าจืดของ ดร.สุ ภฎา คีรี รัฐนิ คม
และคณะ และระบบควบคุมคุณภาพนํ้ าของสถานแสดงพันธุ์สัตว์นํ้ าสงขลา ทดลองขยายกล้าเชื้ อแบคทีเรี ยดีไนตริ ไฟอิง
นํามาเพาะเลี้ ยงแบบกึ่ งกะ ในแต่ละถัง แบ่งออกเป็ น 3 ถัง ปริ มาตรถังละ 5 ลิตร ถังแรกเป็ นกล้าเชื้ อแบคทีเรี ยดี ไนตริ ไฟ
อิ งที่ระดับความเค็ม 15 พีพี ที ถังที่ สองเป็ นกล้าเชื้ อแบคทีเรี ยดีไนตริ ไฟอิงที่ระดับความเค็ม 7 พีพี ที และถังที่สามเป็ นกล้า
เชื้อแบคทีเรี ยดี ไนตริไฟอิงที่ ระดับความเค็ม 1 พีพีที โดยแต่ ละถังจะเกิดปฏิกิ ริ ยาแยกจากกันและเสร็จสิ้ นภายในแต่ละถัง
เติมนํ้ าทิ้งสังเคราะห์ ที่มีความเข้มข้นของ NO3
--N ประมาณ 100 มิลลิกรัมต่อลิ ตร และเติมกรดอะซีติกเพื่อเป็ นแหล่ง
คาร์ บอนสําหรั บแบคทีเรี ย นํ้ าทิ้งสังเคราะห์เรี ยกว่า Artificial saline wastewater (ASW) ซึ่ งมี การดัดแปลงจาก ดอกรัก
ชัยสาร และคณะ (2550) โดยใช้กรดอะซีติกเป็ นแหล่งคาร์บอนสําหรับแบคทีเรี ยในปริ มาตร 1.3 มิลลิลิตรต่อลิตร
„µ¦˜¦ª‹ª·Á‡¦µ³®r ‡»–£µ¡œÎʵ
วิเคราะห์ปริ มาณไนไตรท์ โดยใช้ชุดทดสอบสําเร็ จรู ป ที่ใช้ร่ วมกับเครื่ อง Spectroquant NOVA 60 (Merck
Germany) วิเคราะห์ปริ มาณไนเตรทด้วยวิธีการของนิ แอ และคณะ (2548) และตรวจวัด ค่าอุณหภูมิ ความเค็ม และค่าพี
เอช ด้วย Multiprobe (YSI model 600 QS, Germany)
„µ¦«¹„¬µ‹ÎµœªœÂ‡š¸Á¦¸¥—¸Åœ˜¦·Å¢°·Š—o ª¥Áš‡œ·‡ MPN Å¤Ã‡¦Áš‡œ·‡
นับจํานวนแบคทีเรี ยดีไนตริ ไฟอิง โดยใช้วิธี การที่ดัดแปลงจาก Soto et al. (2002)
„µ¦«¹„¬µ£µª³š¸ÉÁ®¤µ³¤Äœ„µ¦Îµ´ —ÅœÁ˜¦šÃ—¥ Response Surface Methodology (RSM)
การศึกษาสภาวะที่ เหมาะสมในการบําบัดไนเตรท โดยใช้กล้าเชื้ อแบคทีเรี ยดีไนตริ ไฟอิงที่เป็ นตัวแทน มาจาก
การเพาะเลี้ ยงแบบกึ่ งกะ ประกอบด้วย 3 ระดับความเค็ม คือ ระดับความเค็มที่ 15 พีพีที ระดับความเค็มที่ 7 พีพีที และ
ระดับความเค็มที่ 1 พี พีที กําหนดปั จจัยในการทดลอง ที่เกี่ยวข้องกับสภาวะที่เหมาะสมในการบําบัดไนเตรท คือ ตัวแปร
อิ สระ และตัวแปรตาม ตัวแปรอิสระ คือ พีเอชเริ่ มต้น (X1) ความเข้มข้นของแหล่ งคาร์บอน (X2) คื อ กรดอะซี ติก
(มิลลิลิ ตรต่อลิตร) ความเข้มข้นของ Yeast Extract (X3) (กรั มต่อลิตร) และค่าความเร็ วรอบของการกวน (X4) (rpm)
การทดลองนี้ มีวัตถุประสงค์ เพื่อ เลือกสภาวะที่เหมาะสมในการบําบัดไนเตรทของแบคที เรี ยดีไนตริ ไฟอิง ดังนั้ นตัวแปร
ตาม คือ ประสิทธิ ภาพของการบําบัดไนเตรท หลังจากนั้นทําการทดลองตามสภาวะของแต่ละชุ ดการทดลองทั้ง 21 ชุ ด
การทดลองดังที่ออกแบบไว้แล้วจากโปรแกรม RSM และวางแผนการทดลองแบบ CCD ดังแสดงในตารางที่ 1 ซึ่ ง
จะต้องวิเคราะห์ ผลของข้อมูล โดยใช้สมการพอลิเมียลอันดับสอง ซึ่ งสามารถเสนอสมการจําลองทางคณิ ตศาสตร์ ได้แก่
Yn = b0 + b1X1 + b2X2 + b3X3 + b12X1X2 + b 23X2X3 + b 11X12 + b22X22 + b33X32
เมื่อ Y n = ประสิ ทธิภาพของการบําบัดไนเตรท b 0= ค่าคงที่ bn = ‡nµ´ ¤ž¦³·š›·Í „µ¦™—™°¥
Xn = ˜´ªÂž¦°· ¦³ n = จํานวนของตัวแปรอิสระ
61
การประชุมวิชาการระดับชาติ มหาวิ ทยาลัยทักษิณ ครั้งที่ 22 ประจำปี 2555