973
4. Öćøüĉ
đÙøćąĀŤ
Öĉ
ÝÖøøöđĂîĕàöŤ
ĕúđðÿ (Lipase Activity) ×ĂÜĒïÙìĊ
đøĊ
÷ìĊę
ÙĆ
éĒ÷Öĕéš
4.1 ÖćøđêøĊ
÷ö Crude enzyme
îĞ
ćĒïÙìĊ
đøĊ
÷ìĊę
ÙĆ
éĒ÷Öĕéš
ÝćÖך
Ăǰ3ǰöćüĉ
đÙøćąĀŤ
Öĉ
ÝÖøøöđĂîĕàöŤ
ĕúđðÿēé÷đúĊĚ
÷ÜĒïÙìĊ
đøĊ
÷ĔîĂćĀćøǰNBǰïŠ
öìĊę
Ăč
èĀõĎ
öĉ
ǰ 7ǰĂÜýćđàúđàĊ
÷ÿǰđðŨ
îđüúćǰ ǰßĆę
üēöÜǰÝćÖîĆĚ
îðøĆ
ïÙüćöđך
öך
î×ĂÜĒïÙìĊ
đøĊ
÷ēé÷üĆ
éÙŠ
ćÖćøéĎ
éÖúČ
îĒÿÜéš
ü÷
đÙøČ
ę
ĂÜǰUV-Visible spectrophotometer ìĊę
Ùüćö÷ćüÙúČ
ę
îǰ
ǰîćēîđöêøǰĔĀš
öĊ
ÙŠ
ćÖćøéĎ
éÖúČ
îĒÿÜđìŠ
ćÖĆ
ïǰ0.08 ëċ
Üǰ ǰ
ÝąìĞ
ćĔĀš
öĊ
Ùüćöđך
öך
î×ĂÜđßČĚ
ĂĒïÙìĊ
đøĊ
÷đøĉę
öêš
îđìŠ
ćÖĆ
ïǰ1.5x
8
ǰCFU/mlǰĒúąëŠ
ć÷đßČĚ
Ăðøĉ
öćêøǰ1ǰöĉ
úúĉ
úĉ
êøǰĔÿŠ
úÜĔîĂćĀćøǰ
SM ðøĉ
öćêøǰ9ǰöĉ
úúĉ
úĉ
êøǰđóćąđúĊĚ
÷ÜïîđÙøČę
ĂÜđ×÷Š
ćìĊę
Ăč
èĀõĎ
öĉ
ǰ ǰĂÜýćđàúđàĊ
÷ÿǰÙüćöđøĘ
üøĂïǰ
ǰøĂïêŠ
ĂîćìĊ
ǰđðŨ
îđüúćǰ
ǰßĆę
üēöÜǰĒúš
üîĞ
ćĕððŦũ
îđĀüĊę
÷ÜìĊę
ÙüćöđøĘ
üǰ5000 øĂïêŠ
ĂîćìĊ
ǰĂč
èĀõĎ
öĉ
ǰ ǰĂÜýćđàúđàĊ
÷ÿǰđðŨ
îđüúćǰ30ǰîćìĊ
ǰĒ÷ÖđÖĘ
ïÿŠ
üîĔÿǰǰ
(Supernatant ǰìĊę
ĕéš
ÙČ
Ăÿćøúąúć÷đĂîĕàöŤ
ĕúđðÿđøĊ
÷ÖÿŠ
üîîĊĚ
üŠ
ćǰCrude enzymeǰîĞ
ćđÖĘ
ïĕüš
ìĊę
Ăč
èĀõĎ
öĉ
ǰ4ǰĂÜýćđàúđàĊ
÷ÿǰ
đóČę
ĂîĞ
ćĕðüĉ
đÙøćąĀŤ
Öĉ
ÝÖøøöđĂîĕàöŤ
ĕúđðÿêŠ
Ăĕð [15]
4.2 üĉ
íĊ
üĉ
đÙøćąĀŤ
Öĉ
ÝÖøøöđĂîĕàöŤ
ĕúđðÿ (Lipase activity)
ǰǰđêøĊ
÷öÿćøêĆĚ
Üêš
îǰðøąÖĂïéš
ü÷ǰēóúĊ
ĕüîĉ
úĒĂúÖĂăĂúŤ
ǰ PVA ǰøš
Ă÷úąǰ2 ðøĉ
öćêø 45ǰöĉ
úúĉ
úĉ
êøǰîĚĞ
ćÖúĆę
îðøĉ
öćêøǰ
45ǰöĉ
úúĉ
úĉ
êøǰĒúąîĚĞ
ćöĆ
îöąÖĂÖðøĉ
öćêøǰ10ǰöĉ
úúĉ
úĉ
êøǰĔÿŠ
Ĕî×üéøĎ
ðßöóĎŠ
×îćéǰ250ǰöĉ
úúĉ
úĉ
êøǰðøĉ
öćêøǰ2ǰöĉ
úúĉ
úĉ
êøǰñÿöÖĆ
ï
ÿćøúąúć÷đĂîĕàöŤ
ĕúđðÿðøĉ
öćêøǰ4 öĉ
úúĉ
úĉ
êøǰĒúąÿćøúąúć÷ïĆ
ôđôĂøŤ
ìĊę
ǰpH 7 ðøĉ
öćêøǰ2 öĉ
úúĉ
úĉ
êøǰĒúš
üîĞ
ćĕðǰǰǰǰǰǰǰǰǰǰǰ
ïŠ
öïîđÙøČę
ĂÜđ×÷Š
ćìĊę
Ăč
èĀõĎ
öĉ
ǰ35ǰĂÜýćđàúđàĊ
÷ÿǰđðŨ
îđüúćǰ5 îćìĊ
ǰĒúąĀúĆ
ÜÝćÖîĆĚ
îđøĉę
öđ×÷Š
ćéš
ü÷ÙüćöđøĘ
üǰ150 øĂïêŠ
ĂîćìĊ
ǰ
đðŨ
îđüúćǰ1 ßĆę
üēöÜǰđöČę
ĂÙøïđüúćìĞ
ćÖćø÷Ć
ï÷ĆĚ
Üðäĉ
Öĉ
øĉ
÷ćēé÷Ĕßš
ÿćøúąúć÷ñÿöøąĀüŠ
ćÜĂąàĉ
ēêîĒúąđĂìćîĂúǰĔîĂĆ
êøćÿŠ
üîǰ
1:1 ðøĉ
öćêøǰ20ǰöĉ
úúĉ
úĉ
êøǰÝćÖîĆĚ
îđêĉ
öôŘ
îĂúŤ
ôìćúĊ
îðøĉ
öćêøǰ4-5 Ā÷éǰĒúš
üÝċ
ÜîĞ
ćĕðĕêđêøìéš
ü÷ÿćøúąúć÷öćêøåćîǰ
0.05N NaOH Ýîÿćøúąúć÷đðŨ
îÿĊ
ßöóĎ
ĂŠ
ĂîÝċ
ÜĀ÷č
éÖćøĕêđêøìǰìĉĚ
Üÿćøúąúć÷ĕüš
ĀćÖõć÷Ĕîǰ30ǰüĉ
îćìĊ
ǰÿĊ
ßöóĎ
ĕöŠ
Āć÷ĕðǰǰ
ëČ
ĂüŠ
ćđðŨ
îÝč
é÷č
êĉ
ǰÖćøìĞ
ćǰBlank ìĞ
ćđĀöČ
ĂîÖćøìéÿĂïđĂîĕàöŤ
êŠ
ćÜÖĆ
îìĊę
Öćøđêĉ
öÿćø÷Ć
ï÷ĆĚ
Üðäĉ
Öĉ
øĉ
÷ćøąĀüŠ
ćÜĂąàĉ
ēêîĒúąđĂìćîĂúǰǰǰǰǰǰǰǰǰǰǰǰ
ÖŠ
ĂîÖćøđêĉ
öÿćøúąúć÷đĂîĕàöŤ
ǰ
[16] ĒúąÙĞ
ćîüèĀćÖĉ
ÝÖøøöđĂîĕàöŤ
ĕúđðÿéĆ
ÜÿöÖćøìĊę
ǰ2
Öĉ
ÝÖøøöđĂîĕàöŤ
ĕúđðÿǰ ĀîŠ
ü÷êŠ
Ăöĉ
úúĉ
úĉ
êø =
(2)
ēé÷
M =ǰēöú×ĂÜǰNaOH ìĊę
ëĎ
ÖĔßš
ĔîÖćøìĞ
ćðäĉ
Öĉ
øĉ
÷ćǰàċę
ÜÙĞ
ćîüèĕéš
ÝćÖðøĉ
öćèǰNaOH x ēöúć×ĂÜǰNaOH
Mo = ēöú×ĂÜǰNaOH ìĊę
ëĎ
ÖĔßš
ĔîÖćøìĞ
ćðäĉ
Öĉ
øĉ
÷ćÖĆ
ïǰBlankǰàċę
ÜÙĞ
ćîüèĕéš
ÝćÖðøĉ
öćèǰNaOH x ēöúć×ĂÜǰNaOH
ÙüćößĆ
îǰ= ÙüćößĆ
î×ĂÜÖøćôöćêøåćî×ĂÜÖøéēĂđúĂĉ
Öǰ
ñúÖćøüĉ
ÝĆ
÷ĒúąĂõĉ
ðøć÷ñúÖćøüĉ
ÝĆ
÷
1. ĒïÙìĊ
đøĊ
÷ìĊę
ÙĆ
éĒ÷Öĕéš
ĒúąúĆ
ÖþèąìćÜÿĆ
èåćîüĉ
ì÷ć
ĒïÙìĊ
đøĊ
÷ìĊę
ÙĆ
éĒ÷Öĕéš
ÝćÖêĆ
üĂ÷Š
ćÜéĉ
îïøĉ
đüèøĂïėǰÿëćîìĊę
ñúĉ
êðúćÿš
öĒúąîĚĞ
ćđÿĊ
÷ÝćÖÖćøñúĉ
êðúćÿš
öĔîóČĚ
îìĊę
ÝĆ
ÜĀüĆ
éóąđ÷ćǰìĆĚ
ÜĀöéǰ4ǰÝč
éǰóïüŠ
ćÿćöćøëÙĆ
éĒ÷ÖĒïÙìĊ
đøĊ
÷ìĊę
đÝøĉ
âïîÝćîĂćĀćøǰScreening medium ĒúąöĊ
Öćø
đðúĊę
÷îÿĊ
ǰbromocresol purple ĔîÝćîĂćĀćøÝćÖÿĊ
öŠ
üÜđðŨ
îÿĊ
đĀúČ
ĂÜĕéš
ìĆĚ
ÜĀöéǰ14ǰĕĂēàđúìǰđîČę
ĂÜöćÝćÖÖúĕÖÖćø÷Š
Ă÷
ÿúć÷ĕ×öĆ
îēé÷ĒïÙìĊ
đøĊ
÷ìĊę
ñúĉ
êđĂîĕàöŤ
ĕúđðÿîĆĚ
îǰđĂîĕàöŤ
ĕúđðÿìĊę
ñúĉ
ê×ċĚ
îõć÷ĔîđàúúŤ
ÝąëĎ
Ö×Ć
ïĂĂÖöćõć÷îĂÖđàúúŤ
đóČę
ĂĔĀš
đĂîĕàöŤ
ìĞ
ćðäĉ
Öĉ
øĉ
÷ćÖĆ
ïîĚĞ
ćöĆ
îĒúąĕ×öĆ
îĕ×öĆ
îǰĕéš
ñúĉ
êõĆ
èæŤ
đðŨ
îǰÖúĊ
đàĂøĂúǰĒúąÖøéĕ×öĆ
îĂĉ
ÿøąǰ[9] àċę
ÜÖøéĕ×öĆ
î
Ăĉ
ÿøąìĊę
đÖĉ
é×ċĚ
îìĞ
ćĔĀš
đÖĉ
éÖćøđðúĊę
÷îÿĊ
bromocresol purple ĔîÝćîĂćĀćøÝćÖÿĊ
öŠ
üÜđðŨ
îÿĊ
đĀúČ
ĂÜǰđðŨ
îĒïÙìĊ
đøĊ
÷ìĊę
ÙĆ
éĒ÷Ö
ĕéš
ÝćÖéĉ
îÝĞ
ćîüîǰ1 ĕĂēàđúìǰĕéš
ĒÖŠ
ǰDS1
úĆ
ÖþèąìćÜÿĆ
èåćîüĉ
ì÷ć÷š
Ăöêĉ
éÿĊ
ĒÖøöïüÖǰøĎ
ðøŠ
ćÜÖúö đøĊ
÷ÜêĆ
üđðŨ
îÖúčŠ
öÙúš
ć÷
M-M0
ÙüćößĆ
îǰ 1.1x10
-3
)
