972
üĉ
íĊ
Öćøüĉ
ÝĆ
÷
1. ÖćøđÖĘ
ïêĆ
üĂ÷Š
ćÜéĉ
îĒúąîĚĞ
ćđÿĊ
÷ïøĉ
đüèÿëćîìĊę
ñúĉ
êðúćÿš
öđóČę
ĂÙĆ
éĒ÷ÖĒïÙìĊ
đøĊ
÷
đÖĘ
ïêĆ
üĂ÷Š
ćÜéĉ
îïøĉ
đüèøĂïė ÿëćîìĊę
ñúĉ
êðúćÿš
öĒúąîĚĞ
ćđÿĊ
÷ÝćÖÖćøñúĉ
êðúćÿš
öĔîóČĚ
îìĊę
ÝĆ
ÜĀüĆ
éóąđ÷ć ìĆĚ
ÜĀöé
4 Ýč
é ðøĉ
öćêøǰ500 öĉ
úúĉ
úĉ
êøǰĔÿŠ
Ĕî×üéÿĊ
ßćǰ×îćéǰ1000 öĉ
úúĉ
úĉ
êøǰìĊę
ñŠ
ćîÖćøÛŠ
ćđßČĚ
ĂĒúš
üǰđÖĘ
ïøĆ
Öþćÿõćóĕüš
ìĊę
Ăč
èĀõĎ
öĉ
ǰ
ǰĂÜýćđàúđàĊ
÷ÿǰĒúš
üîĞ
ćÿŠ
ÜĕðĀš
ĂÜðäĉ
ïĆ
êĉ
Öćøõć÷Ĕîǰ24 ßĆę
üēöÜ đóČę
ĂîĞ
ćöćìĞ
ćÖćøÙĆ
éĒ÷ÖĒïÙìĊ
đøĊ
÷ìĊę
öĊ
ÙüćöÿćöćøëĔîÖćø
ñúĉ
êđĂîĕàöŤ
ĕúđðÿĒúąđóČę
ĂĔßš
ĔîÖćøìéúĂÜêŠ
Ăĕð [10]
ÖćøÙĆ
éĒ÷ÖĒïÙìĊ
đøĊ
÷ĒúąÖćøìĞ
ćĔĀš
ïøĉ
ÿč
ìíĉĝ
ÙĆ
éĒ÷ÖĒïÙìĊ
đøĊ
÷ìĊę
öĊ
ÙüćöÿćöćøëĔîÖćøñúĉ
êđĂîĕàöŤ
ĕúđðÿǰ lipase ǰēé÷ðŗ
đðêêĆ
üĂ÷Š
ćÜéĉ
îĒúąîĚĞ
ćđÿĊ
÷ǰðøĉ
öćêø
êĆ
üĂ÷Š
ćÜúą 10 öĉ
úúĉ
úĉ
êøǰĔÿŠ
Ĕî×üéøĎ
ðßöóĎŠ
ǰ×îćéǰ250 öĉ
úúĉ
úĉ
êøǰìĊę
öĊ
ĂćĀćøǰScreening Medium SM) ðøąÖĂïéš
ü÷
Fresh fish fat 10.0 g, KH
2
PO
4
1.0 g, NH
4
)
2
SO
4
0.5 g, MgSO
4
.7H
2
O 5 g ñÿöĔîîĚĞ
ćÖúĆę
îǰ1000 öĉ
úúĉ
úĉ
êø [11]
ðøĉ
öćêøǰ90 öĉ
úúĉ
úĉ
êøǰîĞ
ćĕðđóćąđúĊĚ
÷ÜïîđÙøČę
ĂÜđ×÷Š
ćìĊę
Ăč
èĀõĎ
öĉ
ǰ37 ĂÜýćđàúđàĊ
÷ÿǰÙüćöđøĘ
üøĂïǰ180 øĂïêŠ
ĂîćìĊ
ǰ
đðŨ
îđüúćǰ48 ßĆę
üēöÜǰÙĆ
éđúČ
ĂÖđÞóćą×üéìĊę
öĊ
ÖćøđðúĊę
÷îÿĊ
ǰBromocresol purple ĔîĂćĀćøđĀúüÝćÖÿĊ
öŠ
üÜđðŨ
îÿĊ
đĀúČ
ĂÜöć
ìĞ
ć Ten fold serial dilution ēé÷ìĞ
ćÖćøđÝČ
ĂÝćÜìĊę
Ùüćöđך
öך
îǰ
-
ëċ
Üǰ
-6
Ĕîøš
Ă÷úąǰ
ǰ×ĂÜǰNaCl ÝćÖîĆĚ
îðŗ
đðê
îĚĞ
ćêĆ
üĂ÷Š
ćÜǰðøĉ
öćêøǰ0.1 öĉ
úúĉ
úĉ
êøǰìĊę
ÙüćöđÝČ
ĂÝćÜǰ10
-4
, 10
-5
Ēúąǰ10
-6
ĕðìĞ
ćÖćøǰSpread plate ēé÷ìĞ
ćÙüćöđÝČ
ĂÝćÜúąǰ
2 àĚĞ
ćǰïîÝćîĂćĀćøĒ×Ę
ÜǰSM đóćąđúĊĚ
÷ÜìĊę
Ăč
èĀõĎ
öĉ
ǰ30 ĂÜýćđàúđàĊ
÷ÿ đðŨ
îđüúćǰ48 ßĆę
üēöÜǰÙĆ
éđúČ
ĂÖēÙēúîĊ
ìĊę
öĊ
ÖćøđðúĊę
÷îÿĊ
ǰ
Bromocresol purple ÝćÖÿĊ
öŠ
üÜđðŨ
îÿĊ
đĀúČ
ĂÜĒúąöĊ
úĆ
ÖþèąēÙēúîĊ
ĒêÖêŠ
ćÜÖĆ
îöćìĞ
ćÖćøǰStreak plate ïîÝćîĂćĀćøǰ
Nutrient Agar NA) đóČę
ĂĔĀš
ĕéš
đðŨ
îēÙēúîĊ
đéĊę
÷üǰÝćÖîĆĚ
îĔßš
úĎ
ðĒêąēÙēúîĊ
ĒúąđÖúĊę
÷đßČ
Ě
ĂúÜïîÿĕúéŤ
ìĊę
öĊ
îĚĞ
ćÖúĆę
îðøąöćèǰ
ǰĀ÷éǰĔĀš
ÖøąÝć÷đðŨ
îĒñŠ
îôŗ
úŤ
öïćÜė ĕöŠ
ĔĀš
ĀîćĒîŠ
îöćÖÝîđÖĉ
îĕðĒúąðúŠ
Ă÷ĔĀš
ĒĀš
Ü ìĞ
ćÖćøêøċ
ÜđßČĚ
ĂĔĀš
êĉ
éĒîŠ
îÖĆ
ïÿĕúéŤ
đóČę
ĂĔĀš
đßČĚ
ĂĕöŠ
Āúč
éĂĂÖ×èą÷š
ĂöÿĊ
ǰēé÷ýċ
ÖþćúĆ
ÖþèąìćÜÿĆ
èåćîüĉ
ì÷ć×ĂÜĒïÙìĊ
đøĊ
÷éĆ
ÜêŠ
ĂĕðîĊĚ
ǰýċ
ÖþćÖćøêĉ
éÿĊ
ĒÖøöǰøĎ
ðøŠ
ćÜ
ĒúąÖćøÝĆ
éđøĊ
÷ÜêĆ
ü×ĂÜđàúúŤ
ǰõć÷Ĕêš
Öúš
ĂÜÝč
úìøøýîŤ
ìĊę
ÖĞ
ćúĆ
Ü×÷ć÷ǰ1000x ĒúąđÖĘ
ïĒïÙìĊ
đøĊ
÷ĔîǰNA Slant đóČę
ĂìĞ
ćÖćø
üĉ
đÙøćąĀŤ
Öĉ
ÝÖøøöđĂîĕàöŤ
ĕúđðÿǰ(Lipase Activity) ×ĂÜĒïÙìĊ
đøĊ
÷ìĊę
ÙĆ
éĒ÷Öĕéš
[12] ÖćøđÖĘ
ïđßČĚ
ĂĒïÙìĊ
đøĊ
÷ïøĉ
ÿč
ìíĉĝ
ēé÷îĞ
ć
đßČĚ
ĂĒïÙìĊ
đøĊ
÷ìĊę
ÙĆ
éĒ÷Öĕéš
ĔÿŠ
ĔîĂćĀćøǰNutrient Broth NB ǰđóćąđúĊĚ
÷ÜìĊę
Ăč
èĀõĎ
öĉ
ǰ30 ĂÜýćđàúđàĊ
÷ÿǰđðŨ
îđüúćǰ24 ßĆę
üēöÜǰ
Ēúš
üðŗ
đðêÿćøúąúć÷đßČĚ
Ăǰðøĉ
öćêøǰ0.5 öĉ
úúĉ
úĉ
êøǰĔÿŠ
úÜĔîĀúĂéđÖĘ
ïÿćøúąúć÷ǰ×îćéǰ1.5 öĉ
úúĉ
úĉ
êøǰđêĉ
öǰGlycerol úÜĕðǰ
ðøĉ
öćêøǰ0.5 öĉ
úúĉ
úĉ
êøǰñÿöĔĀš
đך
ćÖĆ
îĒúš
üđÖĘ
ïđßČĚ
ĂĔîêĎš
đ÷Ę
îìĊę
Ăč
èĀõĎ
öĉ
ǰ-20 ĂÜýćđàúđàĊ
÷ÿ [11]
3. ÖćøÙĆ
éđúČ
ĂÖĒïÙìĊ
đøĊ
÷ìĊę
ñúĉ
êđĂîĕàöŤ
ĕúđðÿēé÷éĎ
ÖćøđÖĉ
éïøĉ
đüèēàîĔÿ Clear zone)
îĞ
ćĒïÙìĊ
đøĊ
÷ìĊę
ÙĆ
éĒ÷Öĕéš
ÝćÖך
Ăǰ2 öćêøüÝÿĂïÙüćöÿćöćøëĔîÖćøñúĉ
êđĂîĕàöŤ
ĕúđðÿéš
ü÷üĉ
íĊ
ÖćøüĆ
éēàîĔÿ
Clear zone)
ìĊę
đÖĉ
é×ċĚ
îïîÝćîĂćĀćøǰTributyrin Agar TA) îĞ
ćĒïÙìĊ
đøĊ
÷ìĊę
ÙĆ
éĒ÷Öĕéš
ĕððøĆ
ïÙüćöđך
öך
î×ĂÜđßČĚ
ĂĒïÙìĊ
đøĊ
÷
ēé÷üĆ
éÙŠ
ćÖćøéĎ
éÖúČ
îĒÿÜéš
ü÷đÙøČę
ĂÜǰUV-Visible spectrophotometer ìĊę
Ùüćö÷ćüÙúČę
îǰ ǰîćēîđöêøǰĔĀš
öĊ
ÙŠ
ćÖćøéĎ
éÖúČ
îĒÿÜ
đìŠ
ćÖĆ
ïǰ0.08 ëċ
Üǰ ǰÝąìĞ
ćĔĀš
öĊ
Ùüćöđך
öך
î×ĂÜđßČĚ
ĂĒïÙìĊ
đøĊ
÷đøĉę
öêš
îđìŠ
ćÖĆ
ïǰ1.5x CFU/ml ÝćÖîĆĚ
îðŗ
đðêÿćøúąúć÷đßČĚ
Ă
ĒïÙìĊ
đøĊ
÷ðøĉ
öćêøǰ100 ĕöēÙøúĉ
êøǰĀ÷éúÜïîĂćĀćøǰTA ìĆĚ
ÜĀöéǰ4Ýč
éǰïŠ
öìĊę
Ăč
èĀõĎ
öĉ
ǰ37ĂÜýćđàúđàĊ
÷ÿ đðŨ
îđüúćǰ48 ßĆę
üēöÜ
ĒúąêøüÝüĆ
éñúÖćøìéúĂÜēé÷ÖćøïĆ
îìċ
Ö×îćéđÿš
îñŠ
ćîýĎ
î÷Ť
ÖúćÜ×ĂÜēàîĔÿĒúą×îćéđÿš
îñŠ
ćîýĎ
î÷Ť
ÖúćÜ×ĂÜēÙēúîĊ
ìĊę
đÖĉ
é×ċĚ
îïîĂćĀćøǰTA ĀîŠ
ü÷đðŨ
îöĉ
úúĉ
đöêø ǰ[13] ĒúąÙĞ
ćîüè ĀćÙŠ
ćéĆ
ßîĊ
đĂöĕàöŤ
ĕúđðÿ [14] éĆ
ÜÿöÖćøìĊę
1
1)
éĆ
ßîĊ
đĂîĕàöŤ
ĕúđðÿ =
đÿš
îñŠ
ćîýĎ
î÷Ť
ÖúćÜēàîĔÿǰ öĉ
úúĉ
đöêø
đÿš
îñŠ
ćîýĎ
î÷Ť
ÖúćÜēÙēúîĊ
ǰ öĉ
úúĉ
đöêø
