1333
ÝąđĀĘ
îĕéš
üŠ
ć hBD-1, -2 Ēúą -3 öĊ
ÙüćöđÖĊę
÷üך
ĂÜÖĆ
ïÖćøéĞ
ćđîĉ
îēøÙ×ĂÜēøÙðøĉ
ìĆ
îêŤ
ĒêŠ
ĔîðŦ
ÝÝč
ïĆ
î÷Ć
ÜĕöŠ
öĊ
Üćîüĉ
ÝĆ
÷
đÖĊę
÷üÖĆ
ïñú×ĂÜ hBDs êŠ
ĂđàúúŤ
ÿúć÷ÖøąéĎ
Ö Öćøýċ
ÖþćîĊĚ
Ýċ
ÜöĊ
üĆ
êëč
ðøąÿÜÙŤ
đóČę
Ă ýċ
Öþćñú×ĂÜ hBD-1, -2 Ēúą -3 êŠ
ĂÖćøÿøš
ćÜ
ĒúąÖćøìĞ
ćĀîš
ćìĊę
×ĂÜđàúúŤ
ÿúć÷ÖøąéĎ
ÖĔîĀš
ĂÜðäĉ
ïĆ
êĉ
Öćø
üĉ
íĊ
Öćøüĉ
ÝĆ
÷
Üćîüĉ
ÝĆ
÷îĊĚ
đðŨ
îÖćøýċ
ÖþćĔîĀš
ĂÜðäĉ
ïĆ
êĉ
ÖćøđóČę
Ăýċ
ÖþćÙč
èÿöïĆ
êĉ
×ĂÜđóðĕìéŤ
êš
ćîÝč
úßĊ
ó hBD-1, -2 Ēúą -3 êŠ
ĂÖćø
ÿøš
ćÜĒúąÖćøìĞ
ćÜćî×ĂÜđàúúŤ
ÿúć÷ÖøąéĎ
Ö àċę
ÜÖćøýċ
ÖþćÝąðøąÖĂïéš
ü÷×ĆĚ
îêĂî éĆ
ÜîĊĚ
1. ÖćøĒ÷ÖđàúúŤ
đöĘ
éđúČ
Ăé×ćüßîĉ
éēöēîîĉ
üđÙúĊ
÷øŤ
đàúúŤ
ĂĂÖÝćÖđúČ
ĂééĞ
ćÙøïÿŠ
üî ÝćÖĂćÿćÿöĆ
ÙøìĊę
öĊ
ÿč
×õćóĒ×Ę
ÜĒøÜ
ĕöŠ
öĊ
ēøÙðøąÝĞ
ćêĆ
ü ĕöŠ
öĊ
ðøąüĆ
êĉ
đðŨ
îēøÙðøĉ
ìĆ
îêŤ
ĂĆ
Öđÿï Ăć÷č
18-25 ðŘ
ÝĞ
ćîüî 3 Ùî ìĞ
ćÖćøìéÿĂïĒïï triplication) ēé÷
Ýąêš
ĂÜñŠ
ćîÖćø÷ĉ
î÷ĂöĔĀš
ÙüćöøŠ
üööČ
ĂĔîÖćøìĞ
ćüĉ
ÝĆ
÷Ēúąĕéš
øĆ
ïĂîč
öĆ
êĉ
ÝćÖÙèąÖøøöÖćøóĉ
ìĆ
ÖþŤ
ÿĉ
ìíĉĝ
Ą ×ĂÜÙèąìĆ
îê
Ēóì÷ýćÿêøŤ
öĀćüĉ
ì÷ćúĆ
÷đßĊ
÷ÜĔĀöŠ
ÝćÖîĆĚ
îìĞ
ćÖćøĒ÷ÖđàúúŤ
đöĘ
éđúČ
Ăé×ćüßîĉ
éēöēîîĉ
üđÙúĊ
÷øŤ
đàúúŤ
éš
ü÷üĉ
íĊ
Ficoll–Hypaque
density gradient centrifugation ēé÷đÝČ
ĂÝćÜêĆ
üĂ÷Š
ćÜđúČ
ĂééĞ
ćÙøïÿŠ
üîéš
ü÷ÿćøúąúć÷ðúĂéđßČĚ
Ă phosphate buffered
saline PBS) ìĊę
ĂĆ
êøćÿŠ
üî 1:1 ÝćÖîĆĚ
îîĞ
ćĕðĔÿŠ
ĀúĂéìéúĂÜìĊę
öĊ
ÿćøúąúć÷ Ficoll-Hypaque GE Healthcare Bio-Sciences,
Uppsala, Sweden) îĞ
ćĕððŦũ
îéš
ü÷đÙøČę
ĂÜðŦũ
îđĀüĊę
÷ÜìĊę
ÙüćöĒøÜ 300 g đðŨ
îđüúć 30 îćìĊ
đÖĘ
ïđàúúŤ
đöĘ
éđúČ
Ăé×ćüßîĉ
éēöēî
îĉ
üđÙúĊ
÷øŤ
đàúúŤ
ĔîßĆĚ
î buffy coat ðŦũ
îúš
ćÜđàúúŤ
éš
ü÷ PBS 2 øĂï îĆ
ïÝĞ
ćîüîđàúúŤ
ìĊę
ĕéš
ĒúąðøĆ
ïÙüćöđך
öך
îĔĀš
đðŨ
î 3x10
6
đàúúŤ
êŠ
Ăöĉ
úúĉ
úĉ
êø ĔîĂćĀćøđúĊĚ
÷ÜđàúúŤ
ßîĉ
é
Į
-MEM Lonza Walkersville, Inc., Walkersville, MD, USA) ìĊę
öĊ
10% fetal calf
serum Invitrogen, Carlsbad, CA, USA), 1% penicillin/streptomycin Invitrogen) Ēúą 2 öĉ
úúĉ
ēöúćøŤ
L-glutamine
Lonza Walkersville, Inc.) đóČę
ĂĔßš
ìĞ
ćÖćøìéÿĂïêŠ
Ăĕð
2. ìéÿĂïÙüćöđðŨ
îóĉ
þ×ĂÜ hBDs êŠ
ĂđàúúŤ
êš
îÖĞ
ćđîĉ
éđàúúŤ
ÿúć÷ÖøąéĎ
Ö ēé÷đúĊĚ
÷ÜđàúúŤ
đöĘ
éđúČ
Ăé×ćüßîĉ
éēöēî
îĉ
üđÙúĊ
÷øŤ
đàúúŤ
øŠ
üöÖĆ
ïĂćĀćøđúĊĚ
÷ÜđàúúŤ
ìĊę
öĊ
hBD-1 ĀøČ
Ă -2 ĀøČ
Ă -3 Peptide Institute, Inc., Osaka, Japan) ìĊę
øąéĆ
ïÙüćö
đך
öך
î 1, 2, 5, 7, 10 Ēúą 12 ĕöēÙøēöúćøŤ
đðŨ
îđüúć 24 ßĆę
üēöÜ ìéÿĂïÙüćööĊ
ßĊ
üĉ
ê×ĂÜđàúúŤ
ēé÷đêĉ
öÿćø 3- 4,5-
dimethylthyazol-2-yl)-2,5-diphennyltetrazolium bromide MTT) Sigma-Aldrich, St. Louis, MO, USA) ìĊę
Ùüćö
đך
öך
î 5 öĉ
úúĉ
ÖøĆ
öêŠ
Ăöĉ
úúĉ
úĉ
êø đðŨ
îđüúć 4 ßĆę
üēöÜ đàúúŤ
ìĊę
öĊ
ßĊ
üĉ
êÝąÿćöćøëđðúĊę
÷îÿćøéĆ
ÜÖúŠ
ćüĔĀš
Öúć÷đðŨ
îñúċ
Ö formazan ÿĊ
öŠ
üÜ ÝćÖîĆĚ
îúąúć÷ñúċ
Öéš
ü÷ dimethyl sulfoxide DMSO) Amresco, Solon, Ohio) üĆ
éÙŠ
ćÖćøéĎ
éÖúČ
îĒÿÜìĊę
540 îćēî
đöêø đóČę
ĂÙĞ
ćîüèÙüćööĊ
ßĊ
üĉ
ê×ĂÜđàúúŤ
3. ìéÿĂïñú×ĂÜ hBDs êŠ
ĂÖćøÖøąêčš
îÖćøÿøš
ćÜđàúúŤ
ÿúć÷ÖøąéĎ
Ö ēé÷Öøąêčš
îēöēîîĉ
üđÙúĊ
÷øŤ
đàúúŤ
ĔĀš
Öúć÷đðŨ
îđàúúŤ
ÿúć÷ÖøąéĎ
Öéš
ü÷ M-CSF R&D systems, Inc., Minneapolis, MN, USA) Ēúą RANKL R&D system, Inc.) øŠ
üöÖĆ
ï hBD-1
ĀøČ
Ă -2 ĀøČ
Ă -3 Ùüćöđך
öך
î 0.2, 1 Ēúą 5 ĕöēÙøēöúćøŤ
đðŨ
îđüúć 7 üĆ
î ÝćÖîĆĚ
îêøċ
ÜÿõćóđàúúŤ
éš
ü÷ÿćøúąúć÷ 4%
paraformaldehyde Sigma-Aldrich) Ĕî PBS Ēúš
ü÷š
ĂöđàúúŤ
éš
ü÷ 1.5 öĉ
úúĉ
ēöúćøŤ
Fast Red Violet LB salt Sigma-
Aldrich) đóČę
ĂîĆ
ïÝĞ
ćîüîđàúúŤ
ÿúć÷ÖøąéĎ
Öàċę
ÜđðŨ
îđàúúŤ
ìĊę
êĉ
éÿĊ
ĒúąöĊ
îĉ
üđÙúĊ
÷ÿêĆĚ
ÜĒêŠ
3 îĉ
üđÙúĊ
÷ÿ×ċĚ
îĕð
4. ìéÿĂïñú×ĂÜ hBDs êŠ
ĂÖćøìĞ
ćÜćî×ĂÜđàúúŤ
ÿúć÷ÖøąéĎ
Ö ēé÷Öøąêčš
îēöēîîĉ
üđÙúĊ
÷øŤ
đàúúŤ
ĔĀš
Öúć÷đðŨ
îđàúúŤ
ÿúć÷
ÖøąéĎ
Öéš
ü÷ M-CSF Ēúą RANKL øŠ
üöÖĆ
ïÖćøĔßš
hBD-1 ĀøČ
Ă -2 ĀøČ
Ă -3 Ùüćöđך
öך
î 5 ĕöēÙøēöúćøŤ
ïî dentine slices
đðŨ
îđüúć 14 üĆ
î ÝćÖîĆĚ
îúš
ćÜđàúúŤ
ìĊę
đÖćąïî dentine slices ĂĂÖ Ēúš
ü÷š
Ăöéš
ü÷ Indian ink ÙĞ
ćîüèïøĉ
đüèìĊę
đÖĉ
éđðŨ
îĀúč
ö
resorption pit) Ēúąêĉ
éÿĊ
ēðøĒÖøö Image J
