full2012.pdf - page 1353

3
„µ¦Á˜¦¸¥¤µ¦„´ —®¥µÂ°Ž·Ã˜œÂ¨³µ¦„´—Á°šµœ°¨ 87.5 %
นํายางสาคูจากอําเภอบันนังสตา จังหวัดยะลา โดยนําก้านใบสาคูมาตัดเป็ นท่อนๆ ละ 15 เซนติเมตร ปล่อยให้
ยางไหลลงในบีกเกอร์ และผลเถาคันที่ ยังไม่สุก (มีสีเขียว) เก็บได้จากบริ เวณอําเภอเมือง จังหวัดสงขลา ดังภาพที่ 1
ยางสาคู ผลเถาคัน
ภาพที่ 1 แสดงลักษณะของยางสาคูและผลเถาคัน
นํายางสาคูและผลเถาคันอย่ างละ 15 กรัม มาทําการสกัดด้วยแอซิโตนและเอทานอล 87.5% ปริ มาตร 250
มิลลิลิ ตร โดยวิธีการแช่ในตัวทําละลายและคนเป็ นเวลา 5 ชั่วโมง จากนั้ นกรองเอาส่ วนกากออก แล้วนําสารละลายที่
กรองได้ไประเหยเอาตัวทําละลายออกด้วยการระเหยแบบลดความดัน ได้สารสกัดหยาบจากยางสาคูและผลเถาคัน
„µ¦ª·Á‡¦µ³®r „¦—°¨¢µÅ±—¦°„Ž¸Äœµ¦„´—¥µŠµ‡¼Â¨³Ÿ¨Á™µ‡´œ
นําสารสกัดหยาบแอซิโตนและสารสกัดหยาบเอทานอล 87.5% ของยางสาคูและผลเถาคันมาทดสอบด้วย
เทคนิคโครมาโทกราฟี กระดาษ เที ยบกับกรดมาตรฐานทั้ง 5 ชนิด ทําการแยกโดยใช้ตัวทําละลายที่มีส่วนผสมของ
เอ็น-โปรปานอล กับ แอมโมเนียมไฮดรอกไซด์ (7 : 3) และนํ้ ายาชะที่มีส่วนผสมของ เอ็น-บิวทานอล กับ กรดแอซิ ติก
และนํ้า (4 : 1 : 1) แล้วนํามาพ่ นด้วยนํ้ ายาทดสอบโบรโมครีซอลกรี น
„µ¦š—°§š›·Í˜o µœ°°„Ž·Á—´œµ¦„´—®¥µÂ°Ž· ؜¨³µ¦„´—®¥µÁ°šµœ°¨ 87.5%
1. „µ¦š—°§š›·Í ˜o µœ°°„Ž·Á—´œÁºÊ°Š˜oœ
นําสารสกัดหยาบแอซิ โตนและสารสกัดหยาบเอทานอล 87.5% ของยางสาคูและผลเถาคันมาละลายด้วย
เมทานอล หลังจากนั้นนํามาจุดบนแผ่นโครมาโทกราฟี กแผ่นบาง (TLC) เทียบกับสารละลายวิตามิ นซี แล้วนําไปทําการ
แยกในตัวทําละลายคลอโรฟอร์ม : เมทานอล (85 : 15) หลังจากนั้ นส่ องแผ่น TLC ด้วยรั งสี UV และพ่นด้วยสารละลาย
DPPH (2, 2-Diphenyl-1-picrylhydrazyl) ในเมทานอลที่ความเข้มข้น 6 u 10 -5 M
2. „µ¦š—°§š›·Í˜o µœ°°„Ž·Á—´œ—oª¥ª· ›¸ DPPH radical scavenging assay (Yamazaki et al., 1994 )
เตรียมสารละลายของสารสกัดหยาบในเมทานอลให้มีความเข้มข้นต่ าง ๆ (1000 u 10-3, 500 u 10-3, 250 u 10-3,
125 u 10-3, 62.50 u 10-3 และ 31.25 u 10-3 มิลลิกรั ม/มิลลิลิตร) ในกรณี สารละลายมาตรฐาน (BHT) เตรียมสารละลายที่
มีความเข้มข้น 1000 u 10-3, 500 u 10-3, 250 u 10-3, 125 u 10-3, 62.50 u 10 -3, 31.25 u 10 -3, 15.62 u 10-3, 7.81 u 10-3,
3.91 u 10 -3 และ 1.95 u 10-3 มิลลิกรั ม/มิลลิลิ ตร จากนั้ นนําสารละลาย 6 u 10-5 M DPPH มาผสมกับสารละลายของสาร
สกัดและสารละลายมาตรฐานที่ความเข้มข้นต่างๆ ในอัตราส่ วน 1 : 1 เขย่าให้เข้ากัน แล้วบ่มที่ อุณหภูมิ 25 องศาเซลเซียส
เป็ นเวลา 30 นาที วัดค่าการดูดกลืนแสงที่ความยาวคลื่น 517 นาโนเมตร คํานวณเปอร์เซ็ นต์การต้านอนุ มูล DPPH จาก
สมการต่อไปนี้
% Radical scavenging = [1- (Asample / A control) ] u 100
เมื่อ A sample คือ ค่ าการดูดกลืนแสงของสารตัวอย่างที่ ความยาวคลื่น 517 นาโนเมตร
1353
การประชุมวิชาการระดับชาติ มหาวิ ทยาลัยทักษิณ ครั้งที่ 22 ประจำปี 2555