การประชุมวิชาการระดับชาติมหาวิทยาลัยทักษิณ 2559 - page 27

26
มีปริมาณสารฟีนอลิ กสูงกว่าต้ นอ่อนที่แช่ในน ้ากลั่น 3 เท่ า ต้นอ่อนที่มีปริมาณสารฟีนอลิ กสูงสุด 4.5 มิ ลลิกรัมต่ อกรัม
น ้าหนักสด และความสามารถในการต้านออกซิเดชันของต้นอ่อนที่ ได้จากเมล็ดที่แช่ในโปรตีนไฮโดรไลเสทจากปลาและสาร
สกัดจากออริกาโนมีค่าสูงกว่าต้นอ่อนที่งอกจากเมล็ดที่ผ่านการแช่น ้า [12] นอกจากนียังพบว่าโปรตีนไฮโดรไลเสทจากปลา
ยังส่งผลให้ต้นอ่ อนของถั่วเหลือง มะเขือเทศ และข้าวโพดมี ปริมาณสารฟีนอลิก ปริมาณคลอโรฟิ ลล์และกิจกรรมจ้าเพาะ
ของเอนไซม์ guaiacol peroxidase สูงกว่าต้นอ่อนที่ เกิดจากเมล็ดที่แช่ด้วยน ้ากลั่น [10]
นอกจากนีมีผลการศึกษาความสามารถในการกระตุ้นการสร้างพฤกษเคมีของต้นอ่อนด้วยวิตามินซี และกรดโฟ-
ลิกซึ่ งพบว่าสารทังสองชนิดสามารถกระตุ้นให้ต้นอ่อนถั่วลันเตามีปริมาณสารฟี นอลิกสูงกว่าต้นอ่อนที่งอกจากเมล็ดที่แช่
ด้วยน ้า และยั งพบว่านอกจากความสามารถในการต้านออกซิเดชันจะสูงแล้ว กิ จกรรมจ้าเพาะของเอนไซม์เปอร์ออกซิเดส
คะตาเลส ซุปเปอร์ออกไซด์ ดิสมิวเทส มีค่าเพิ่มขึนเช่นกัน ซึ่ งมีความสอดคล้องกับปริมาณฟีนอลิกและความสามารถในการ
ต้านออกซิ เดชัน [1] ส่วนการกระตุ้นต้นอ่อนหมามุ่ยด้วยสารละลายโปรตีนไฮโดรไลเสทจากปลา แลคโตเฟอริ นและสาร
สกัดจากออริกาโนสามารถเพิ่ มคุณค่ าทางอาหารให้เพิ่ มขึน พบว่าโปรตี นไฮโดรไลเสทจากปลาเข้มข้น 2 มิลลิกรั มต่อลิตร
ท้าให้ต้นอ่อนที่ มีปริมาณของสารในกลุ่มฟีนอลิกสูงสุด 19 มิลลิกรัมต่อกรัมน ้าหนักสดในต้นอ่ อนที่มีอายุ 1 วันซึ่งมีปริมาณ
ของสารในกลุ่มฟีนอลิกสูงกว่ าต้นอ่ อนที่เกิดจากเมล็ ดที่แช่ด้วยน ้ากลั่นร้ อยละ 38 นอกจากนียังพบว่ าต้นอ่อนหมามุ่ยอายุ 4
วัน สารในกลุ่มฟีนอลิกและความสามารถในการต้านออกซิเดชันสูง [13] งานวิจัยนีมีวัตถุประสงค์เพื่อศึกษาผลของวิตามินซี
ที่มีผลต่อการสร้างพฤกษเคมีในต้นอ่อนดาวเรื อง ซึ่งในเบื องต้นนีจะตรวจหาปริมาณสารฟีนอลิก ความสามารถในการต้ าน
ออกซิเดชัน ปริ มาณคลอโรฟิลล์และกิจกรรมจ้าเพาะของเอนไซม์ เปอร์ออกซิเดส ก่อนที่จะขยายผลไปตรวจสอบสารพฤกษ
เคมีชนิดอื่นที่ต้นอ่ อนดาวเรืองอาจจะสร้างขึนซึ่ งมีผลในด้านเภสัชกรรมต่อไป
วิธีการวิจัย
1 ขันตอนการท้าการกระตุ้นการงอกของเมล็ด
น้าเมล็ดดาวเรืองแช่ในน ้ าและสารละลายวิตามินซี ที่ระดับความเข้มข้น 25 50 75 และ 100 มิลลิกรัมต่อลิตร
นาน 6 ชั่วโมง จากนันทิงไว้ ให้แห้งเป็นเวลา 1 คืน แล้วน้าลงจานเพาะเมล็ดและเติมน ้าเพื่อให้ความชุ่ มชืนทิงไว้ ในที่มืด เมื่อ
เมล็ดงอกรากย้ายลงปลูกในถาดเพาะเมล็ด เก็บต้นอ่อนดาวเรืองทุกวันที่ 7, 9, 12, 15 และ 18 หลังจากการงอก เพื่อท้ า
การทดลองในขันตอนต่อไป การทดลองนี ท้าทังหมด 3 ซ ้า ๆ ละ 50 เมล็ด
2 การสกัดหาปริมาณสารประกอบฟี นอลิกและความสามารถในการต้านอนุมูลอิสระ
ดัดแปลงจากวิธีของ Burguieres et al. [1] น้าต้นอ่อนดาวเรืองมา 50 มิ ลลิกรัม เติมเอทานอลเข้มข้นร้อยละ 95
จ้านวน 2.50 มิลลิลิตร แช่ เย็นทิงไว้เป็นเวลา 72 ชั่วโมง จากนันน้าปั่นด้วยความเร็ว 17,000 รอบต่ อนาที นาน 30 วิ นาที
แล้วน้ามาปั่ นเหวี่ยงที่ 10,000 g เป็นเวลา 10 นาที เก็ บสารละลายส่วนใสเพื่อใช้ในการหาปริ มาณสารในกลุ่มฟีนอลิกและ
สารต้านอนุมูลอิสระ
3 การหาปริมาณสารในกลุ่มฟีนอลิก (Total phenolics assay)
ดัดแปลงจากวิธีของ Burguieres et al. [1] น้าสารสกัดตัวอย่ างมา 1.00 มิลลิลิตร เติมเอทานอลเข้มข้นร้อยละ
95 จ้านวน 1.00 มิลลิลิตร เติมน ้ากลั่นลงไป 5.00 มิ ลลิลิ ตร และสารละลาย Folin-Ciocalteu phenol reagent เข้มข้น
ร้อยละ 50 ปริ มาตรต่อปริมาตร จ้านวน 0.50 มิลลิลิตร ผสมให้ เข้ากันแล้ วทิงไว้ 5 นาที จากนันเติมสารละลายโซเดียม
คาร์บอเนตเข้มข้นร้อยละ 5 น ้าหนั กต่อปริมาตร ลงไป 1.00 มิ ลลิลิ ตร ผสมให้เข้ ากัน ทิงไว้ ที่อุณหภูมิห้องในที่มืดเป็นเวลา
1 ชั่วโมง จากนันน้าไปวัดค่าการดูดกลืนแสงที่ 725 นาโนเมตร ค้านวณค่าปริมาณสารในกลุ่มฟีนอลรวมทั งหมดเทียบกับ
กราฟมาตรฐานกรดแกลลิก (Gallic acid) และค้านวณหาปริมาณสารฟีนอลิกทังหมดจากสมการ m
V c C
