processding59.pdf - page 124

1024
ñúÖćøüĉ
ÝĆ
÷ĒúąĂõĉ
ðøć÷ñúÖćøüĉ
ÝĆ
÷
Öćøđóĉę
öðøĉ
öćèñúñúĉ
êǰPCR ×ĂÜ÷Ċ
îǰ S rRNA
ÖćøÿÖĆ
éÝĊ
ēîöĉ
ÖéĊ
đĂĘ
îđĂǰ gDNA ǰ×ĂÜĒïÙìĊ
đøĊ
÷ĔîêĆ
üĂ÷Š
ćÜîĚĞ
ćîöéĉ
ïēé÷êøÜǰéš
ü÷ßč
éÿÖĆ
éǰPureLink Genomic
DNA kits (Invitrogen, USA) ÿćöćøëÿÖĆ
ééĊ
đĂĘ
îđĂ×ĂÜĒïÙìĊ
đøĊ
÷ÝćÖêĆ
üĂ÷Š
ćÜǰHTSU-01 HTSU-02 HTSU-03 HTSU-
04 MTSU-1 ǰMTSU-1 ǰMTSU-1 ǰĒúą MTSU-1 ǰöĊ
Ùüćöđך
öך
îĂ÷ĎŠ
Ĕîߊ
üÜǰ50-325 ĕöēÙøÖøĆ
öêŠ
ĂĕöēÙøúĉ
êøǰ(ך
ĂöĎ
ú
ĕöŠ
ĕéš
ĒÿéÜ) đöČę
ĂîĞ
ćĕðêøüÝÿĂïÙč
èõćóéš
ü÷üĉ
íĊ
ǰagarose gel electrophoresis Ùüćöđך
öך
îøš
Ă÷úąǰ1 óïüŠ
ć gDNAǰìĊę
ĕéš
öĊ
Ùč
èõćóéĊ
ĔĀš
ĒëïéĊ
đĂĘ
îđĂìĊę
ßĆ
éđÝîǰĔî ēé÷đÞóćąĔîêĆ
üĂ÷Š
ćÜǰHTSU-01ǰHTSU-03 HTSU-04ǰĒúąǰMTSU-1 ǰÙüćö
đך
öך
îĂ÷ĎŠ
øąĀüŠ
ćÜǰ
-
ǰĕöēÙøÖøĆ
öêŠ
ĂĕöēÙøúĉ
êøǰĔî×èąìĊę
êĆ
üĂ÷Š
ćÜǰHTSU-0 ǰMTSU-1 ǰMTSU-1 ǰĒúą MTSU-
1 ǰĕéš
ðøĉ
öćèǰgDNA ðøąöćèǰ -
ǰĕöēÙøÖøĆ
öêŠ
ĂĕöēÙøúĉ
êø
Öćøđóĉę
öðøĉ
öćè÷Ċ
îǰ S rRNA ĒúąêĞ
ćĒĀîŠ
ÜǰV3 éš
ü÷üĉ
íĊ
ǰnested PCR
đÝČ
ĂÝćÜêĆ
üĂ÷Š
ćÜǰgDNAǰ×ĂÜĒêŠ
úąêĆ
üĂ÷Š
ćÜǰĔĀš
öĊ
Ùüćöđך
öך
îǰ ǰĕöēÙøÖøĆ
öêŠ
ĂĕöēÙøúĉ
êøǰđóČę
ĂĔßš
đðŨ
îǰ DNA êš
îĒïï
ÿĞ
ćĀøĆ
ï Öćøđóĉę
öðøĉ
öćè÷Ċ
îǰ16S rRNA éš
ü÷üĉ
íĊ
PCR ēé÷Ĕßš
ĕóøđöĂøŤ
ǰ27F Ēúą1525RǰóïüŠ
ćìč
ÖêĆ
üĂ÷Š
ćÜĕéš
ñúñúĉ
êǰPCR
×îćéðøąöćèǰ1,400 ÙĎŠ
đïÿǰÝćÖêĆ
üĂ÷Š
ćÜǰHTSU-01ǰHTSU-02 HTSU-03ǰHTSU-04 MTSU-11 MTSU-12 MTSU-13
ĒúąǰMTSU-14 (õćóìĊę
ǰ A) ñúñúĉ
êǰPCR ×ĂÜ÷Ċ
îǰ16S rRNA ëĎ
ÖîĞ
ćöćìĞ
ćïøĉ
ÿč
ìíĉĝ
éš
ü÷ßč
éìĞ
ćïøĉ
ÿč
ìíĉĝ
ǰPureLink PCR
product purification đóČę
ĂĔßš
đðŨ
îǰDNA êš
îĒïïÿĞ
ćĀøĆ
ïÝćÖÖćøđóĉę
öðøĉ
öćèߊ
üÜǰV3 Region ×ĂÜ÷Ċ
îǰ16S rRNAǰđìÙîĉ
Ùǰ
PCRǰēé÷Ĕßš
ĕóøđöĂøŤ
357F-GC àċę
ÜöĊ
ǰGC-ClampǰĒúąĕóøđöĂøŤ
518ǰÝćÖîĆĚ
îîĞ
ćöć ñúñúĉ
êǰPCR öćüĉ
đÙøćąĀŤ
ǰïî
agarose gelǰÙüćöđך
öך
îøš
Ă÷úąǰ1.5ǰĒúš
ü÷š
Ăöéš
ü÷ÿĊ
SYBR Greenēé÷îĞ
ćöćêøüÝÿĂïõć÷Ĕêš
ĒÿÜĂĆ
úêøćĕüēĂđúêĒ
ǰ
Ēúąéš
ü÷đÙøČę
ĂÜëŠ
ć÷õćóéš
ü÷ßč
éëŠ
ć÷õćóChemiDoc™ MP System (BIO-RAD)ǰàċę
ÜđöČę
ĂđðøĊ
÷ïđìĊ
÷ï×îćéñúñúĉ
êǰPCR
ÖĆ
ïǰDNA ×îćéöćêøåćîǰ100 ÙĎŠ
đïÿǰóïüŠ
ć×îćé×ĂÜñúñúĉ
êǰPCR ×ĂÜêĞ
ćĒĀîŠ
ÜǰV3 ×ĂÜ÷Ċ
îǰ16S rRNA öĊ
×îćé
ðøąöćè 200-250 ÙĎŠ
đïÿǰÝćÖêĆ
üĂ÷Š
ćÜǰHTSU-01ǰHTSU-02 HTSU-03ǰHTSU-04 MTSU-11 MTSU-12 MTSU-13
ĒúąǰMTSU-14 (õćóìĊę
ǰ B)
1...,114,115,116,117,118,119,120,121,122,123 125,126,127,128,129,130,131,132,133,134,...300
Powered by FlippingBook