913
ÖćøđêøĊ
÷öĒïÙìĊ
đøĊ
÷àĆ
úēöđîúúćđóČę
ĂĔßš
đðŨ
îĒïÙìĊ
đøĊ
÷éĆ
ßîĊ
ìéÿĂïùìíĉĝ
ÖŠ
ĂÖúć÷óĆ
îíčŤ
üĉ
íĊ
đĂöÿŤ
îĞ
ćđßČĚ
Ă
ǰ4BMNPOFMMBǰUZQIJNVSJVN
ÿć÷óĆ
îíčŤ
TA98 Ēúą TA100 öć×Ċ
éúÜïîĂćĀćøđúĊĚ
÷ÜđßČĚ
ĂĒ×Ę
Ü Nutrient No.2
Ēúš
üîĞ
ćĕðïŠ
öđúĊĚ
÷ÜìĊę
Ăč
èĀõĎ
öĉ
30 ĂÜýćđàúđàĊ
÷ÿđðŨ
îđüúć 1-2 üĆ
îĀøČ
ĂÝîÖøąìĆę
ÜðøćÖäēÙēúîĊ
óøš
ĂöîĞ
ćĕðìéÿĂïùìíĉĝ
ÖŠ
Ă
Öúć÷óĆ
îíčŤ
éš
ü÷üĉ
íĊ
đĂöÿŤ
ÖćøđêøĊ
÷öîĚĞ
ćđúĊĚ
÷ÜđßČĚ
ĂĀøČ
ĂÿćøÿÖĆ
éîĚĞ
ćđúĊĚ
÷ÜđßČĚ
ĂÿđêøðēêöĆ
÷àĊ
ìĒúąïćàĉ
úúĆ
ÿ
îĞ
ćĀúĂéđóćąđúĊĚ
÷ÜđßČĚ
ĂÿđêøðēêöĆ
÷àĊ
ìĒúąïćàĉ
úúĆ
ÿĕðïŠ
öĔîêĎš
ïŠ
öđßČĚ
ĂĒïïđ×÷Š
ć Orbital-shaking incubator) ìĊę
Ăč
èĀõĎ
öĉ
ĂÜýćđàúđàĊ
÷ÿ ìĊę
ÙüćöđøĘ
üøĂï
øĂïêŠ
ĂîćìĊ
ïŠ
öđúĊ
Ě
÷ÜđðŨ
îđüúć üĆ
îĀøČ
ĂðøćÖäÖćøđÝøĉ
â×ĂÜđßČĚ
Ă
ÝćÖîĆĚ
îĒ÷ÖÿćøĒ×üîúĂ÷đßČĚ
ĂĒïÙìĊ
đøĊ
÷éš
ü÷ÖćøðŦũ
îêÖêąÖĂîìĊę
Ăč
èĀõĎ
öĉ
ĂÜýćđàúđàĊ
÷ÿ ÙüćöđøĘ
üøĂï 1 ,
øĂïêŠ
Ă
îćìĊ
đðŨ
îđüúć îćìĊ
Ē÷ÖđÖĘ
ïîĚĞ
ćđúĊĚ
÷ÜđßČĚ
Ă
ÖćøìéÿĂïùìíĉĝ
ÖŠ
ĂÖúć÷óĆ
îíčŤ
éš
ü÷üĉ
íĊ
đĂöÿŤ
[5]
đ×Ċę
÷ēÙēúîĊ
×ĂÜđßČĚ
Ă
4 ǰUZQIJNVSJVN
ÿć÷óĆ
îíčŤ
TA98 Ēúą TA1 ÝćÖÝćîĂćĀćøđúĊĚ
÷ÜđßČĚ
ĂĒ×Ę
Ü nutrient No.2 úÜ
ĕðĔî öĉ
úúĉ
úĉ
êø×ĂÜÿćøúąúć÷ēàđéĊ
÷öÙúĂĕøéŤ
đך
öך
î 0.85 đðĂøŤ
đàĘ
îêŤ
Ēúš
üðøĆ
ïđìĊ
÷ïÙüćö×čŠ
îĔĀš
đìŠ
ćÖĆ
ï McFarland
No.0.5 Ēúš
üĔßš
ÿĞ
ćúĊ
óĆ
îðúć÷ĕöš
ðøćýÝćÖđßČĚ
ĂÝčŠ
öÿćøĒ×üîúĂ÷đßČĚ
ĂðŜ
ć÷ĔĀš
ìĆę
üúÜïîñĉ
üĀîš
ć×ĂÜĂćĀćøđúĊĚ
÷ÜđßČĚ
ĂĒ×Ę
Ü
nutrient No.2 êĆĚ
ÜìĉĚ
Üĕüš
Ýîñĉ
üĀîš
ćĂćĀćøĒĀš
Üðøąöćè 3-5 îćìĊ
ÝćÖîĆ
Ě
îđÝćąĀúč
öĔîÝćîđóćąđßČ
Ě
ĂìĊ
ę
éš
ü÷ìĉ
ð×îćé
1,000 ĕöēÙøúĉ
êøìĊę
ðøćýÝćÖđßČĚ
Ă ×îćéđÿš
îñŠ
ćîýĎ
î÷Ť
ÖúćÜ -8 öĉ
úúĉ
đöêø Ēúš
üĀ÷éîĚĞ
ćđúĊĚ
÷ÜđßČĚ
ĂìĊę
ĕéš
ìĞ
ćÖćøđÝČ
ĂÝćÜĕüš
ĒïïÿĂÜđìŠ
ć two fold dilution) úÜĔîĀúč
ö×ĂÜÝćîđóćąđßČ
Ě
ĂìĊ
ę
đêøĊ
÷öĕüš
Āúč
öúą 100 ĕöēÙøúĉ
êø êĆ
Ě
Üìĉ
Ě
Üĕüš
ìĊę
Ăč
èĀõĎ
öĉ
Āš
ĂÜÝîÖøąìĆę
Üÿćøàċ
öđך
ćđîČ
Ě
Ăüč
š
îÝîĀöé Ýċ
ÜîĞ
ćÝćîđóćąđßČ
Ě
ĂìĆ
Ě
ÜĀöéĕðïŠ
öđúĊ
Ě
÷ÜìĊ
ę
Ăč
èĀõĎ
öĉ
7 ĂÜýćđàúđàĊ
÷ÿ
đðŨ
îđüúć ßĆę
üēöÜ ÿĆ
ÜđÖêĒúąïĆ
îìċ
ÖÙüćöđך
öך
îìĊę
ĕöŠ
ÿćöćøë÷Ć
ï÷ĆĚ
ÜÖćøđÝøĉ
â×ĂÜđßČĚ
ĂĒïÙìĊ
đøĊ
÷ ĕöŠ
đÖĉ
éüÜĔÿøĂïĀúč
ö
ìéÿĂï
îĞ
ćîĚĞ
ćđúĊ
Ě
÷ÜđßČ
Ě
ĂìĊ
ę
öĊ
Ùüćöđך
öך
îÿĎ
Üÿč
éÝĞ
ćîüî 3 Ùüćöđך
öך
îìĊ
ę
ĕöŠ
öĊ
ùìíĉ
ĝ
÷Ć
ï÷Ć
Ě
ÜÖćøđÝøĉ
â×ĂÜđßČ
Ě
Ă
ǰ 4 ǰ
UZQIJNVSJVN
ÿć÷óĆ
îíčŤ
TA98 Ēúą TA100ĕðìéÿĂïĀćùìíĉĝ
ÖŠ
ĂÖúć÷óĆ
îíčŤ
éš
ü÷üĉ
íĊ
đĂöÿŤ
éĆ
Üÿøč
ðĔîêćøćÜìĊę
1 Ĕßš
0.8 %
NaCl đðŨ
îêĆ
üÙüïÙč
öñúúï Ēúą -nitroquinoline-1-oxide đðŨ
îêĆ
üÙüïÙč
öñúïüÖ àċę
ÜöĊ
üíĊ
ìĞ
ćēé÷÷Š
Ă éĆ
ÜîĊĚ
ñÿöÿŠ
üîñÿö
ìĆĚ
ÜĀöéĔĀš
đך
ćÖĆ
îēé÷đ×÷Š
ćđïćė ÝćÖîĆ
Ě
îîĞ
ćĀúĂéìéÿĂïìĊ
ę
ĕéš
ìĆ
Ě
ÜĀöéĕðìĞ
ćÖćøïŠ
öđúĊ
Ě
÷ÜĔîêĎ
š
ïŠ
öđßČ
Ě
ĂĒïïđ×÷Š
ćìĊ
ę
Ăč
èĀõĎ
öĉ
ĂÜýćđàúđàĊ
÷ÿ ìĊ
ę
ÙüćöđøĘ
üøĂï 1 øĂïêŠ
ĂîćìĊ
đðŨ
îđüúć îćìĊ
đöČę
ĂïŠ
öÙøïđüúćđêĉ
öĂćĀćøđúĊ
Ě
÷ÜđßČ
Ě
Ă top agar
öĉ
úúĉ
úĉ
êøúÜĔîĒêŠ
úąĀúĂé×ĂÜìč
Ößč
éìéÿĂï ÝćÖîĆĚ
îñÿöÿŠ
üîñÿöìĆĚ
ÜĀöéĔĀš
đך
ćÖĆ
îēé÷đ×÷Š
ćđïćė Ēúš
üđìÿćøéĆ
ÜÖúŠ
ćü
úÜïîÝćîđóćąđßČ
Ě
Ă Glucose minimal agar ĔĀš
ÖøąÝć÷Ă÷Š
ćÜÿöęĞ
ćđÿöĂìĆ
ę
üñĉ
üĀîš
ć×ĂÜÝćîđóćąđßČ
Ě
Ă Ēúš
üÝċ
ÜïŠ
öÝćî
đóćąđßČĚ
ĂìĆĚ
ÜĀöéìĊę
Ăč
èĀõĎ
öĉ
ĂÜýćđàúđàĊ
÷ÿ đðŨ
îđüúć 8 ßĆę
üēöÜ îĆ
ïÝĞ
ćîüîēÙēúîĊ
Öúć÷óĆ
îíčŤ
×ĂÜ
ǰ4 ǰUZQIJNVSJVN
ÿć÷óĆ
îíčŤ
TA98 Ēúą TA100 ìĊę
ðøćÖäïîÝćîđóćąđßČĚ
Ă đóČ
ę
ĂĀćÙŠ
ćéĆ
ßîĊ
ÖćøÖúć÷óĆ
îíčŤ
ìĞ
ćÖćøìéúĂÜ 2 àĚ
Ğ
ć
Öćøüĉ
đÙøćąĀŤ
ך
ĂöĎ
ú
ÖćøìéÿĂïùìíĉĝ
ÖŠ
ĂÖúć÷óĆ
îíčŤ
éš
ü÷üĉ
íĊ
đĂöÿŤ
đóČę
ĂéĎ
ÙüćöÿćöćøëĔîÖćøÖŠ
ĂÖúć÷óĆ
îíčŤ
×ĂÜÿćøĂĂÖùìíĉĝ
ìćÜßĊ
üõćóĔîîĚĞ
ć
đúĊĚ
÷ÜđßČĚ
Ă×ĂÜđßČĚ
ĂÿđêøðēêöĆ
÷àĊ
ìĒúąïćàĉ
úĆ
ÿ éĎ
ĕéš
ÝćÖÙŠ
ćéĆ
ßîĊ
ÖćøÖúć÷óĆ
îíčŤ
mutation index: MI ēé÷ÙĞ
ćîüèĕéš
ÝćÖÖćø
îĞ
ćēÙēúîĊ
Öúć÷óĆ
îíčŤ
revertant colonies öćĀćøéš
ü÷ ēÙēúîĊ
ìĊę
ÿćöćøëÖúć÷óĆ
îíčŤ
ÖúĆ
ïĕéš
đĂÜ spontaneous colonies
Ēúš
üîĞ
ćöćóĉ
ÝćøèćéĎ
ÙŠ
ć MI (MI öćÖÖüŠ
ćđìŠ
ćÖĆ
ï 4 ĒÿéÜüŠ
ćÿćøĂĂÖùìíĉĝ
ìćÜßĊ
üõćóßîĉ
éîĆĚ
îöĊ
ùìíĉĝ
ĔîÖćøÖŠ
ĂÖúć÷óĆ
îíčŤ
)
