956
1.2 đÖĘ
ïêĆ
üĂ÷Š
ćÜîĚĞ
ćđÿĊ
÷ïøĉ
đüèøćÜøąïć÷îĚĞ
ćđÿĊ
÷ÝćÖøš
ćîĂćĀćø×ĂÜüĉ
ì÷ćúĆ
÷óúĆ
ÜÜćîĒúąÿĉę
ÜĒüéúš
ĂöǰöĀćüĉ
ì÷ćúĆ
÷
óąđ÷ćÝĞ
ćîüîǰ ǰøš
ćîǰĒúąøš
ćîĂćĀćøĀîš
ćöĀćüĉ
ì÷ćúĆ
÷óąđ÷ćÝĞ
ćîüîǰ ǰøš
ćîǰðøĉ
öćêøǰ500 öĉ
úúĉ
úĉ
êøǰĔî×üéÿĊ
ßćðøĉ
öćêøǰ
ǰöĉ
úúĉ
úĉ
êøǰìĊę
ñŠ
ćîÖćøÛŠ
ćđßČĚ
ĂĒúš
üǰđÖĘ
ïøĆ
Öþćÿõćóĕüš
ìĊę
Ăč
èĀõĎ
öĉ
ǰ ǰĂÜýćđàúđàĊ
÷ÿǰĒúš
üÿŠ
ÜĕðĀš
ĂÜðäĉ
ïĆ
êĉ
Öćøõć÷Ĕîǰ24
ßĆę
üēöÜǰđóČ
ę
ĂîĞ
ćöćìĞ
ćÖćøÙĆ
éĒ÷ÖĒïÙìĊ
đøĊ
÷ìĊę
öĊ
ÙüćöÿćöćøëĔîÖćøñúĉ
êđĂîĕàöŤ
ĕúđðÿ
ÖćøÙĆ
éĒ÷ÖĒïÙìĊ
đøĊ
÷ĒúąÖćøìĞ
ćĔĀš
ïøĉ
ÿč
ìíĉĝ
ÙĆ
éĒ÷ÖĒïÙìĊ
đøĊ
÷ìĊę
öĊ
ÙüćöÿćöćøëĔîÖćøñúĉ
êđĂîĕàöŤ
ĕúđðÿǰēé÷îĞ
ćêĆ
üĂ÷Š
ćÜéĉ
îìĊę
ðîđðŚŪ
ĂîîĚĞ
ćöĆ
îĒúąĕ×öĆ
îǰ
ðøĉ
öćèǰ ǰÖøĆ
öǰĒúąêĆ
üĂ÷Š
ćÜîĚĞ
ćđÿĊ
÷ðøĉ
öćêøǰ ǰöĉ
úúĉ
úĉ
êøǰĔÿŠ
Ĕîǰ9 ǰöĉ
úúĉ
úĉ
êøǰ×ĂÜǰScreening medium ðøąÖĂïéš
ü÷
îĚĞ
ćöĆ
îðćúŤ
öǰ ǰöĉ
úúĉ
úĉ
êø, ĒĂöēöđîĊ
÷öàĆ
úđôêǰ NH
4
)
2
SO
4
5ǰÖøĆ
ö, ĒïÙēêđðïēêîǰ5ǰÖøĆ
ö, ĒöÖîĊ
đàĊ
÷öàĆ
úđôêǰ
MgSO
4
.7H
2
O) 1ǰÖøĆ
ö,ǰēóĒìÿđàĊ
÷öĕéĕăēéøđÝîôĂÿđôêǰ KH
2
PO
4
) 5ǰÖøĆ
öǰĒúąñÜÿÖĆ
éÝćÖ÷Ċ
ÿêŤ
ǰ1ǰÖøĆ
öǰĔîîĚĞ
ćÖúĆę
î
ðøĉ
öćêøǰ1,000ǰöĉ
úúĉ
úĉ
êøǰ[3] Ēúš
üîĞ
ćĕðïŠ
öĒúąđ×÷Š
ćéš
ü÷đÙøČę
ĂÜǰShaking incubatorǰìĊę
ÙüćöđøĘ
üǰ
ǰøĂïêŠ
ĂîćìĊ
ǰ
Ăč
èĀõĎ
öĉ
ǰ 7ǰĂÜýćđàúđàĊ
÷ÿǰđðŨ
îđüúćǰ ǰÿĆ
ðéćĀŤ
ǰÝćÖîĆĚ
îîĞ
ćöćìĞ
ćÖćøđÝČ
ĂÝćÜìĊę
Ùüćöđך
öך
îǰ
-1
ǰëċ
Üǰ
-7
ǰĔîǰNaCl øš
Ă÷úąǰ
ǰ
ĒúąîĞ
ćÙüćöđÝČ
ĂÝćÜìĊę
Ùüćöđך
öך
îǰ
-
ǰëċ
Üǰ
-7
ǰðøĉ
öćêøǰ ǰöĉ
úúĉ
úĉ
êøǰîĞ
ćĕðǰSpread plate ïîĂćĀćøǰScreening medium
ìĊę
öĊ
Öćøđêĉ
ö Bromocresol purpleǰøš
Ă÷úąǰ
ǰïŠ
öìĊę
Ăč
èĀõĎ
öĉ
ǰ 7ǰĂÜýćđàúđàĊ
÷ÿǰđðŨ
îđüúćǰ ǰßĆę
üēöÜǰÙĆ
éđúČ
ĂÖđÞóćąēÙēúîĊ
ìĊę
öĊ
ÖćøđðúĊę
÷îÿĊ
×ĂÜǰBromocresol purple ĔîĂćĀćøĒ×Ę
ÜÝćÖÿĊ
öŠ
üÜđðŨ
îÿĊ
đĀúČ
ĂÜǰÝćÖîĆĚ
îîĞ
ćēÙēúîĊ
ìĊę
öĊ
ÖćøđðúĊ
÷îÿĊ
×ĂÜ
ĂćĀćøöćìĞ
ćÖćøǰStreak plate ïîǰScreening medium đóČę
ĂĔĀš
ĕéš
ēÙēúîĊ
đéĊę
÷üĒúąëŠ
ć÷ĒïÙìĊ
đøĊ
÷úÜïî Nutrient agar
ïŠ
öìĊę
Ăč
èĀõĎ
öĉ
ǰ ǰĂÜýćđàúđàĊ
÷ÿǰđðŨ
îđüúćǰ ǰßĆę
üēöÜǰÝćÖîĆĚ
îĔßš
úĎ
ðǰ(Loop) ĒêąēÙēúîĊ
ìĊ
ę
đÖĉ
éïøĉ
đüèĔÿøĂïēÙēúîĊ
Ēúą
đÖúĊę
÷đßČĚ
Ăǰ Smear) úÜïîÿĕúéŤ
ìĊę
öĊ
îĚĞ
ćÖúĆę
îðøąöćèǰ ǰĀ÷éǰĔĀš
ÖøąÝć÷đðŨ
îĒñŠ
îôŗ
úŤ
öïćÜėĕöŠ
ĔĀš
ĀîćĒîŠ
îöćÖÝîđÖĉ
îĕðĒúą
ðúŠ
Ă÷ĔĀš
ĒĀš
ÜĒúš
üìĞ
ćÖćøêøċ
ÜđßČĚ
Ăǰ Fix) ĔĀš
êĉ
éĒîŠ
îÖĆ
ïÿĕúéŤ
đóČę
ĂĔĀš
đßČĚ
ĂĕöŠ
Āúč
éĂĂÖ×èą÷š
ĂöÿĊ
ǰēé÷ýċ
ÖþćúĆ
ÖþèąìćÜÿĆ
èåćî
üĉ
ì÷ć×ĂÜđßČĚ
ĂÝč
úĉ
îìøĊ
÷Ť
éĆ
ÜêŠ
ĂĕðîĊĚ
ǰýċ
ÖþćÖćøêĉ
éÿĊ
ĒÖøöǰøĎ
ðøŠ
ćÜÖćøÝĆ
éđøĊ
÷ÜêĆ
ü×ĂÜđàúúŤ
ǰÖćøÿøš
ćÜđĂîēéÿðĂøŤ
õć÷Ĕêš
Öúš
ĂÜ
Ýč
úìøøýîŤ
ǰĒúąđÖĘ
ïøĆ
ÖþćĒïÙìĊ
đøĊ
÷ïøĉ
ÿč
ìíĉĝ
ĕüš
ĔîǰNutrient brothǰìĊę
öĊ
Glycerol øš
Ă÷úąǰ20ǰìĊę
Ăč
èĀõĎ
öĉ
ǰ- ǰĂÜýćđàúđàĊ
÷ÿ
đóČę
ĂìĞ
ćÖćøýċ
ÖþćêŠ
Ăǰ
3. ÖćøÙĆ
éđúČ
ĂÖĒïÙìĊ
đøĊ
÷ìĊę
ñúĉ
êđĂîĕàöŤ
ĕúđðÿēé÷ÖćøéĎ
ïøĉ
đüèĔÿ (Clear zone)
îĞ
ćĒïÙìĊ
đøĊ
÷ìĊę
ÙĆ
éĒ÷Öĕéš
ÝćÖך
Ăǰ2 öćđúĊĚ
÷ÜĔîǰNutrient brothǰđóČę
Ăđóĉę
öðøĉ
öćèĒïÙìĊ
đøĊ
÷ǰÝćÖîĆĚ
îîĞ
ćĒïÙìĊ
đøĊ
÷öćðøĆ
ï
Ùüćöđך
öך
îđøĉę
öêš
î×ĂÜĒïÙìĊ
đøĊ
÷ĔĀš
đìŠ
ćÖĆ
ïǰ 1.5x10 ǰCFU/mlǰēé÷üĆ
éÙŠ
ćÖćøéĎ
éÖúČ
îĒÿÜéš
ü÷đÙøČę
ĂÜǰUV-Visible
Spectrophotometer ìĊę
Ùüćö÷ćüÙúČę
îǰ ǰîćēîđöêøǰĔĀš
öĊ
ÙŠ
ćÖćøéĎ
éÖúČ
îĒÿÜđìŠ
ćÖĆ
ïǰ0.08 ëċ
Üǰ ǰÝćÖîĆĚ
îîĞ
ćöćýċ
ÖþćÙüćöÿćöćøë
ĔîÖćøñúĉ
êđĂîĕàöŤ
ĕúđðÿēé÷ÖćøéĎ
ïøĉ
đüèĔÿǰàċę
ÜìĞ
ćēé÷ëŠ
ć÷ĒïÙìĊ
đøĊ
÷ÝćÖĂćĀćøǰNutrient broth ðøĉ
öćêøǰ ǰǰĕöēÙøúĉ
êøǰĀ÷éúÜïî
ĂćĀćøǰTributyrin agar ðøąÖĂïéš
ü÷ǰĕêøïĎ
ìĉ
øĉ
îǰ ǰöĉ
úúĉ
úĉ
êø, ĒïÙēêđðïēêîǰ ǰÖøĆ
ö, ÿćøÿÖĆ
éÝćÖ÷Ċ
ÿêŤ
ǰ ÖøĆ
ö,ǰĒúąñÜüčš
î 15ǰÖøĆ
öǰ
ĔîîĚĞ
ćÖúĆę
îðøĉ
öćêøǰ1,000ǰöĉ
úúĉ
úĉ
êøǰ[3] ĒúąîĞ
ćĕðïŠ
öìĊę
Ăč
èĀõĎ
öĉ
ǰ ǰĂÜýćđàúđàĊ
÷ÿǰđðŨ
îđüúćǰ ǰßĆ
ę
üēöÜǰüĆ
é×îćéïøĉ
đüèĔÿǰ(Clear
zone) ìĊę
đÖĉ
é×ċĚ
îǰĒúąÙĞ
ćîüèéĆ
ßîĊ
đĂîĕàöŤ
ĕúđðÿêćöÿöÖćøìĊę
ǰ ǰàċę
ÜÙĞ
ćîüèĂĆ
êøćÿŠ
üîøąĀüŠ
ćÜđÿš
îñŠ
ćîýĎ
î÷Ť
ÖúćÜïøĉ
đüèĔÿ
ÖĆ
ïđÿš
îñŠ
ćîýĎ
î÷Ť
ÖúćÜēÙēúîĊ
ǰ[1]
ēé÷ìĞ
ćÖćøÙĆ
éđúČ
ĂÖĒïÙìĊ
đøĊ
÷ìĊę
ÿćöćøëÿøš
ćÜïøĉ
đüèĔÿĕéš
öćÖìĊę
ÿč
éĔîøą÷ąđüúćǰ ǰßĆę
üēöÜǰ
đóČę
ĂìĞ
ćÖćøìéÿĂïÖĉ
ÝÖøøöđĂîĕàöŤ
ĕúđðÿǰ(Lipase activity) êŠ
Ăĕð
éĆ
ßîĊ
đĂîĕàöŤ
ĕúđðÿ = đÿš
îñŠ
ćîýĎ
î÷Ť
ÖúćÜïøĉ
đüèĔÿ öĉ
úúĉ
đöêø
đÿš
îñŠ
ćîýĎ
î÷Ť
ÖúćÜēÙēúîĊ
ǰ öĉ
úúĉ
đöêø
ǰ
ǰ
