957
4. ÖćøìéÿĂïÖĉ
ÝÖøøöđĂîĕàöŤ
ĕúđðÿ (Lipase activity)
. ÖćøđêøĊ
÷ö Crude enzyme
îĞ
ćĒïÙìĊ
đøĊ
÷ìĊę
ĕéš
ÝćÖך
Ăǰ3 öćìéÿĂïÖĉ
ÝÖøøöđĂîĕàöŤ
ĕúđðÿǰ(Lipase activity) ēé÷đúĊĚ
÷ÜĒïÙìĊ
đøĊ
÷ĔîǰNutrient
BrothǰđóČę
Ăđóĉę
öðøĉ
öćèđàúúŤ
×ĂÜĒïÙìĊ
đøĊ
÷ǰÝćÖîĆĚ
îîĞ
ćĕðïŠ
öìĊę
Ăč
èĀõĎ
öĉ
ǰ 7ǰĂÜýćđàúđàĊ
÷ÿǰđðŨ
îđüúćǰ ǰßĆę
üēöÜǰĒúš
üîĞ
ćĕð
ðøĆ
ïÙüćöđך
öך
îđøĉę
öêš
î×ĂÜĒïÙìĊ
đøĊ
÷ĔĀš
đìŠ
ćÖĆ
ïǰ1.5x10
8
ǰCFU/mlǰēé÷üĆ
éÙŠ
ćÖćøéĎ
éÖúČ
îĒÿÜéš
ü÷đÙøČę
ĂÜǰUV-Visible
Spectrophotometer ìĊę
Ùüćö÷ćüÙúČę
îǰ ǰîćēîđöêøǰĔĀš
öĊ
ÙŠ
ćÖćøéĎ
éÖúČ
îĒÿÜđìŠ
ćÖĆ
ïǰ0.08 ëċ
Üǰ ǰÝćÖîĆĚ
îëŠ
ć÷đßČĚ
Ăðøĉ
öćêøǰǰǰǰǰǰǰǰǰǰ
ǰöĉ
úúĉ
úĉ
êøǰúÜĔîĀúĂéìéúĂÜìĊę
öĊ
ǰScreening medium ðøĉ
öćêøǰ ǰöĉ
úúĉ
úĉ
êøǰĒúš
üîĞ
ćĕðïŠ
öĒúąđ×÷Š
ćéš
ü÷đÙøČę
ĂÜǰShaking
incubatorǰìĊę
ÙüćöđøĘ
üǰ ǰøĂïêŠ
ĂîćìĊ
ǰìĊę
Ăč
èĀõĎ
öĉ
ǰ 7ǰĂÜýćđàúđàĊ
÷ÿǰđðŨ
îđüúćǰ ǰßĆę
üēöÜǰÝćÖîĆĚ
îîĞ
ćĕððŦũ
îđĀüĊę
÷ÜìĊę
ÙüćöđøĘ
üǰ
19,000
øĂïêŠ
ĂîćìĊ
ǰìĊę
Ăč
èĀõĎ
öĉ
ǰ ǰĂÜýćđàúđàĊ
÷ÿǰđðŨ
îđüúćǰ ǰîćìĊ
ǰÿŠ
üîĔÿ (Supernatant) ìĊę
ĕéš
ÙČ
Ăÿćøúąúć÷đĂîĕàöŤ
ǰ
ĕúđðÿǰ(Crude enzyme) ĒúąîĞ
ćÿŠ
üîĔÿìĊę
ĕéš
ĕðìéÿĂïÖĉ
ÝÖøøöđĂîĕàöŤ
ĕúđðÿ
. üĉ
íĊ
ìéÿĂïÖĉ
ÝÖøøöđĂîĕàöŤ
ĕúđðÿ
đêøĊ
÷öÿćøêĆĚ
Üêš
îǰéĆ
ÜîĊĚ
ǰÙČ
ĂǰēóúĊ
ĕüîĉ
úĒĂúÖĂăĂúŤ
øš
Ă÷úąǰ ǰðøĉ
öćêøǰ ǰöĉ
úúĉ
úĉ
êøǰîĚĞ
ćÖúĆę
îðøĉ
öćêøǰ ǰöĉ
úúĉ
úĉ
êøǰ
ĒúąîĚĞ
ćöĆ
îöąÖĂÖðøĉ
öćêøǰ ǰöĉ
úúĉ
úĉ
êøǰñÿöÿćøêĆĚ
Üêš
îìĆĚ
ÜĀöéĔĀš
đך
ćÖĆ
îĔîïĊ
ÖđÖĂøŤ
ǰÝćÖîĆĚ
îîĞ
ćÿćøêĆĚ
Üêš
îìĊę
đêøĊ
÷öĕüš
ך
ćÜêš
î
ðøĉ
öćêøǰ ǰöĉ
úúĉ
úĉ
êøǰñÿöÖĆ
ïǰ ǰM phosphate buffer ìĊę
pH 7.0 ðøĉ
öćêøǰ ǰöĉ
úúĉ
úĉ
êøǰĒúąÿćøúąúć÷đĂîĕàöŤ
ĕúđðÿ
ðøĉ
öćêøǰ ǰöĉ
úúĉ
úĉ
êøǰñÿöĔĀš
đך
ćÖĆ
îĔî×üéøĎ
ðßöóĎŠ
ǰ(ÿĞ
ćĀøĆ
ïÖćøìéÿĂïǰBlank đêĉ
ö acetone:ethanol ĔîĂĆ
êøćÿŠ
üîǰ :1
ðøĉ
öćêøǰ ǰöĉ
úúĉ
úĉ
êø)ǰĒúš
üîĞ
ćĕðïŠ
öìĊę
Ăč
èĀõĎ
öĉ
ǰ ǰĂÜýćđàúđàĊ
÷ÿǰđðŨ
îđüúćǰ ǰîćìĊ
ǰÝćÖîĆĚ
îîĞ
ćĕðđ×÷Š
ćéš
ü÷ÙüćöđøĘ
üøĂïǰ
ǰøĂïêŠ
ĂîćìĊ
ǰđðŨ
îđüúćǰ ǰßĆę
üēöÜǰìĊę
Ăč
èĀõĎ
öĉ
ǰ ǰĂÜýćđàúđàĊ
÷ÿǰđöČę
ĂÙøïđüúćĒúš
üđêĉ
öǰacetone:ethanol ĔîĂĆ
êøćÿŠ
üîǰ
1:1 ðøĉ
öćêøǰ ǰöĉ
úúĉ
úĉ
êøǰđóČę
ĂĀ÷č
éðäĉ
Öĉ
øĉ
÷ćǰÝćÖîĆĚ
îđêĉ
öǰphenolpthalein ðøĉ
öćèǰ4-5 Ā÷éǰĒúš
üÝċ
ÜîĞ
ćĕðĕìđìøêéš
ü÷
ÿćøúąúć÷ǰ
ǰN NaOHǰÝîÿćøúąúć÷đðŨ
îÿĊ
ßöóĎ
ĂŠ
ĂîÝċ
ÜĀ÷č
éÖćøĕìđìøêǰìĉĚ
Üÿćøúąúć÷ĕüš
ĀćÖõć÷Ĕîǰ ǰüĉ
îćìĊ
ǰÿĊ
ßöóĎ
ĕöŠ
đðúĊę
÷îëČ
ĂüŠ
ćđðŨ
îÝč
é÷č
êĉ
ÝćÖîĆĚ
îÙĞ
ćîüèÖĉ
ÝÖøøöđĂîĕàöŤ
ĕúđðÿǰĔîĀîŠ
ü÷êŠ
Ăöĉ
úúĉ
úĉ
êøǰ[1]
êćöÿöÖćøìĊę
ǰ
Öĉ
ÝÖøøöđĂîĕàöŤ
ĕúđðÿǰ= (ēöú×ĂÜǰNaOH ìĊę
ëĎ
ÖĔßš
ìĞ
ćðäĉ
Öĉ
øĉ
÷ćǰ-ǰēöú×ĂÜǰNaOH ìĊę
ëĎ
ÖĔßš
ìĞ
ćðäĉ
Öĉ
øĉ
÷ćÖĆ
ïǰblankǰ)
ñúÖćøüĉ
ÝĆ
÷ĒúąĂõĉ
ðøć÷ñúÖćøüĉ
ÝĆ
÷
1.ĒïÙìĊ
đøĊ
÷ìĊę
ÙĆ
éĒ÷Öĕéš
ĒúąúĆ
ÖþèąìćÜÿĆ
èåćîüĉ
ì÷ć
ñúÖćøìéúĂÜóïüŠ
ćÿćöćøëÙĆ
éĒ÷ÖĒïÙìĊ
đøĊ
÷ÝćÖéĉ
îĒúąîĚĞ
ćđÿĊ
÷ìĊę
öĊ
ÖćøđðúĊę
÷îÿĊ
×ĂÜǰBromocresol purple
ÝćÖÿĊ
öŠ
üÜđðŨ
îÿĊ
đĀúČ
ĂÜïîĂćĀćøĒ×Ę
Üĕéš
ìĆĚ
ÜĀöéǰ ǰĕĂēàđúìǰđîČę
ĂÜÝćÖĒïÙìĊ
đøĊ
÷ÝąðúŠ
Ă÷đĂîĕàöŤ
ĕúđðÿĂĂÖöćîĂÖđàúúŤ
đóČę
Ă÷Š
Ă÷ÿúć÷îĚĞ
ćöĆ
îĒúąĕ×öĆ
îǰđöČę
ĂëĎ
Ö÷Š
Ă÷ÿúć÷Ēúš
üÝąöĊ
ÖćøðúéðúŠ
Ă÷Öøéĕ×öĆ
îĂĉ
ÿøąǰĒúąđöČę
ĂöĊ
ÖøéđÖĉ
é×ċĚ
îÝċ
ÜÿŠ
ÜñúĔĀš
Ăĉ
îéĉ
đÙđêĂøŤ
đðúĊę
÷îÝćÖÿĊ
öŠ
üÜđðŨ
îÿĊ
đĀúČ
ĂÜǰ[ ]ǰēé÷ÙĆ
éĒ÷ÖĒïÙìĊ
đøĊ
÷ÝćÖéĉ
îĕéš
ǰ ǰĕĂēàđúìǰĕéš
ĒÖŠ
ǰSLP1 ĒúąǰSLP2 Ēúą
ÝćÖîĚĞ
ćđÿĊ
÷ǰ ǰĕĂēàđúìǰĕéš
ĒÖŠ
ǰWLP1,ǰWLP2 WLP3, WLP4, WLP5, WLP6, WLP6, WLP7, WLP8, WLP9, WLP10,
WLP11, WLP12, WLP13, WLP14, WLP15, WLP16, WLP17, WLP18, WLP19, WLP20, WLP21, WLP22, WLP23,
WLP24, WLP25ǰĒúą WLP26
ǰĒïÙìĊ
đøĊ
÷ìĊę
ÙĆ
éĒ÷Öĕéš
ÝćÖéĉ
îìĊę
ðîđðŚŪ
ĂîîĚĞ
ćöĆ
îĒúąĕ×öĆ
îǰîĞ
ćĕðýċ
ÖþćÖćøêĉ
éÿĊ
ĒÖøöĒúąÖćøÝĆ
éđøĊ
÷ÜêĆ
üõć÷Ĕêš
Öúš
ĂÜÝč
úìøøýîŤ
ìĊę
ÖĞ
ćúĆ
Ü×÷ć÷ǰ
0ǰx óïüŠ
ć SLP1ĒúąǰSLP2 đðŨ
îĒïÙìĊ
đøĊ
÷ĒÖøöúïǰøĎ
ðøŠ
ćÜìŠ
ĂîÿĆĚ
îǰ(Rod ǰÖćøÝĆ
éđøĊ
ֆ
êĆ
üÖøąÝĆ
éÖøąÝć÷ǰ(Scatter)ǰĒÿéÜéĆ
ÜõćóìĊę
ǰ ǰ
ǰĒïÙìĊ
đøĊ
÷ìĊę
ÙĆ
éĒ÷Öĕéš
ÝćÖîĚĞ
ćđÿĊ
÷ÝćÖøš
ćîĂćĀćøìĊę
ðîđðŚŪ
ĂîîĚĞ
ćöĆ
îĒúąĕ×öĆ
îîĞ
ćĕðýċ
ÖþćÖćøêĉ
éÿĊ
ĒÖøöĒúą
ÖćøÝĆ
éđøĊ
÷ÜêĆ
üõć÷Ĕêš
Öúš
ĂÜÝč
úìøøýîŤ
ìĊę
ÖĞ
ćúĆ
Ü×÷ć÷ǰ
0ǰx óïüŠ
ć WLP1, WLP2, WLP3, WLP4, WLP6, WLP7, WLP8,
ÙüćößĆ
î x10
-3
)
ǰ
