full2010.pdf - page 1543

1505
รักษาโรคโลหิ ตจางไดอีกดวย (กองสุ ขาภิบาลอาหาร กรมอนามั ย กระทรวงสาธารณสุข, 2551) นอกจากนั้นรายงานการ
วิจัยที่ผานมายั งพบวาสารสกัดจากเปลือกลิ้นจี่มีฤทธิ์ตานสารอนุ มูลอิสระและสามารถยับยั้งเซลลมะเร็งเตานม (Zhao,
2006; Wang et al., 2006) และเซลลมะเร็งตับ (Wang, 2006) อยางไรก็ตามพบวาในส วนของเมล็ดลิ้นจี่นั้นยังไมเคยมี
การศึ กษามากอน จากคุณสมบัติในการเปนสารตานอนุมูลอิสระและสารยับยั้งเซลล มะเร็งของสารสกั ดจากลิ้นจี่ ผูวิจัยจึง
สนใจที่ จะศึกษาฤทธิ์ตานมะเร็งมะเร็งชองปากของสารสกั ดจากเมล็ดลิ้นจี่และการทดสอบความเป นพิษตอเซลลเม็ดเลือด
ขาวปกติ การวิจัยในครั้ งนี้จึงเปนการคัดกรองฤทธิ์ตานมะเร็งเบื้องตนของสารสกัดจากเมล็ดลิ้นจี่เพื่ อนําผลการทดสอบที่
ได ไปใชพัฒนาเปนยาตานมะเร็งที่มีประสิทธิภาพในการทําลายเซลลมะเร็งและไมมีผลข างเคียงต อเซลลปกติไดตอไปใน
อนาคต
°»ž„¦–r¨³ª·›¸„µ¦
´Êœ˜°œ„µ¦Á¡µ³Á¨¸Ê¥ŠÁŽ¨¨r Human mouth carcinoma (CLS-354 cells)
เลี้ยงเซลล CLS-354 (Cell Line Service, Germany) (passage 24) ในอาหารเลี้ยงเซลล RPMI 1640 (PAA, Austria)
ซึ่งมีองคประกอบตางๆ ครบคือ10% fetal bovine serum (Biochrom AG, Germany) และ 1% penicillin/streptomycin
(PAA, Austria) และ 2 mM glutamine (PAA, Austria)ในตู ควบคุมอุณหภูมิ 37 องศาเซลเซียส ปริมาณกาซ CO 2 5% และ
ความชื้น 95 % โดยมีจํานวนเซลล 1 x 106 เซลลใน flask ซึ่งมีพื้ นที่ 75 ตารางเซนติเมตร เลี้ยงไวเป นระยะเวลา 24-48
ชั่วโมงกอนที่จะทําการทดสอบความเป นพิษของสารสกัดจากผลไมและสมุนไพรตอเซลล
´Êœ˜°œ„µ¦Á¡µ³Á¨¸Ê¥ŠÁŽ¨¨rÁ¤È—Á¨º °— µª (normal lymphocytes)
คั ดเลือกอาสาสมั ครผูที่มีสุขภาพแข็งแรงดีจํานวน 4 คน ที่ประสงคยินยอมเขารวมวิจัย (โครงการนี้ไดผานการ
พิ จารณาเห็นชอบ จากคณะกรรมการจริ ยธรรมการวิจัยในมนุ ษย มหาวิทยาลัยวลัยลั กษณ เลขที่ 52/036) หลั งจากนั้นเจาะ
เลือดอาสาสมัครใส หลอดที่มีสารกันเลือดแข็ง ethylenediaminetetraacetic acid (EDTA) แลวนําเลื อดดังกลาวมาเจือจาง
ดวยอาหารเลี้ยงเซลล RPMI-1640 ที่มีองคประกอบตางๆ ครบในสัดสวน 1:2 หลั งจากนั้นคอยๆ เติมเลือดที่เจือจางไวลงไป
ในหลอดที่มีน้ํายา IsoPrep (Robbins Scientific Corporation, USA) อยางชาๆ หลังจากนั้นนําไปปนที่ 3000 rpm เปนเวลา
15 นาที เมื่อครบเวลาแยก peripheral blood mononuclear cells (PBMCs) ซึ่งอยู ระหวางชั้น (interphase) ออกมาใส
หลอดใหมและล างดวยอาหารเลี้ยงเซลล อีก 2 ครั้ง แลวจึงนําเซลลมาแบ งใหเทากั นในอาหารเลี้ยงเซลล RPMI-1640 ที่มี
องคประกอบต างๆ ครบ หลังจากนั้นนําเซลล มาบมเลี้ยงไวในตูควบคุมอุณหภูมิ 37 องศาเซลเซี ยส ปริมาณกาซ CO2 5%
และ ความชื้น 95 %
´Êœ˜°œ„µ¦š—°§š›·Í˜oµœ¤³Á¦ÈŠn°Šžµ„¨³‡ªµ¤Áž}œ¡·¬˜n°ÁŽ¨¨rÁ¤È—Á¨º °— µª °Šµ¦„´—‹µ„Á¤¨È —¨·Êœ‹¸É
นํ าสารสกัดจากเมล็ดลิ้นจี่ที่ สกัดดวยเมทานอลโดยวิ ธีการสกัดสารแบบตอเนื่อง (continuous extraction) และ
ตามดวยการทําสารสกัดใหเขมขนโดยวิธีการกลั่นในภาวะสุญญากาศ (distillation in vacuum) มาเจือจางแลวนําแต ละการ
เจื อจางมาทดสอบกับเซลลมะเร็งชองปากและเซลลเม็ดเลื อดขาวที่มีจํานวนเซลล 3x10 4 และ 1x105 เซลลตามลําดับ ใน
จานเพาะเลี้ยงเซลลขนาด 24 หลุม (24-well plate) โดยเปรี ยบเทียบกั บเซลลควบคุ มคือเซลลที่เติม dimethyl sulfoxide
(DMSO) ซึ่ งใชเป นตัวทําละลายของสารสกัด แลวนําไปบมในตูควบคุมอุณหภู มิ 37 องศาเซลเซียส ปริมาณก าซ CO2 5%