1506
และ ความชื้
น 95 % เป
นเวลา 24 ชั่
วโมง หลั
งจากนั้
นจึ
งนํ
ามาศึ
กษาการมี
ชี
วิ
ตรอดของเซลล
โดยวิ
ธี
MTT (3-(4,5-
dimethylthiazole-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium bromide) assay.
´Ê
°µ¦«¹
¬µµ¦¤¸
¸
ª·
¦°
°Á¨¨r
Ã¥ª·
¸
MTT assay
เมื่
อครบเวลา 24 ชั่
วโมงของการบ
มสารสกั
ดจากเมล็
ดลิ้
นจี่
กั
บเซลล
มะเร็
งช
องปากหรื
อเซลล
เม็
ดเลื
อดขาว
นํ
าอาหารเลี้
ยงเซลล
ออกแล
วเติ
ม 0.5 ml ของ 0.5 mg/ml MTT ที่
ผสมกั
บอาหารลงในแต
ละหลุ
ม แล
วนํ
าไปบ
มในตู
ควบคุ
ม
อุ
ณหภู
มิ
37 องศาเซลเซี
ยส ปริ
มาณก
าซ CO
2
5% และความชื้
น 95 % เป
นเวลา 4 ชั่
วโมง เพื่
อที่
จะให
MTT ถู
กเมทาบอไลท
เมื่
อครบเวลานํ
าอาหารเลี้
ยงเซลล
ที่
มี
MTT ออก แล
วคว่ํ
า plate ลงบนกระดาษซั
บเพื่
อเอาอาหารที่
เหลื
อออกแล
วเติ
ม
DMSO ลงไปเพื่
อไปละลาย formazan (MTT metabolic product) ออกมาหลั
งจากนั้
นผสม formazan ที่
ออกมากั
บ DMSO
ให
เข
ากั
นแล
วนํ
าไปวั
ดค
าการดู
ดกลื
นแสงที่
560 nm โดยทํ
าการทดสอบซ้
ํ
าอี
ก 3 ครั้
งแต
ละครั้
งทํ
าการทํ
าสอบซ้ํ
าอี
ก 3
การทดสอบย
อย
¨µ¦ª·
´
¥Â¨³°£·
¦µ¥¨
จากการศึ
กษาฤทธิ์
ต
านเซลล
มะเร็
งช
องปากของสารสกั
ดจากเมล็
ดลิ้
นจี่
ในช
วงความเข
มข
น 17.5-175 μg/ml
พบว
าสารสกั
ดดั
งกล
าวสามารถยั
บยั้
งการเจริ
ญของเซลล
มะเร็
งช
องปากได
ร
อยละ 50 ที่
ความเข
มข
น 135.0
P
g/ml
(IC
50
=135.0 μg/ml) และในช
วงความเข
มข
น 35-175
P
g/ml พบว
าทํ
าให
เซลล
มะเร็
งลดลงอย
างมี
นั
ยสํ
าคั
ญทางสถิ
ติ
(p
<0.05) (ภาพที่
1) ส
วนตั
วทํ
าละลาย DMSO ที่
ใช
ทดสอบในช
วงความเข
มข
น 0.1-1.0 % พบว
าไม
มี
ผลต
อเซลล
มะเร็
ง
ช
องปาก จากผลการศึ
กษาครั้
งนี้
เป
นการศึ
กษาแรกที่
พบว
าสารสกั
ดเมทานอลจากเมล็
ดลิ้
นจี่
สามารถยั
บยั้
งเซลล
มะเร็
งช
อง
ปากได
ซึ่
งผลการวิ
จั
ยครั้
งนี้
มี
ความสอดคล
องกั
บผลการศึ
กษาที่
ผ
านมาที่
พบว
าเปลื
อกของสารสกั
ดจากลิ้
นจี่
มี
ฤทธิ์
ยั
บยั้
ง
เซลล
มะเร็
งเต
านม (Zhao, 2006; Wang
et al
., 2006) และเซลล
มะเร็
งตั
บ (Wang, 2006) โดยสารสกั
ดเอทานอลจากเปลื
อก
ลิ้
นจี่
สามารถยั
บยั้
งเซลล
มะเร็
งเต
านมได
ร
อยละ 50 ที่
ความเข
มข
น 80.0
P
g/ml (Wang, 2006) สารสกั
ดจากเปลื
อกลิ้
นจี่
ประกอบไปด
วยสารสํ
าคั
ญที่
มี
ฤทธิ์
ต
านเซลล
มะเร็
งเต
านมคื
อ epicatechin และ procyanidin B2 โดยสารทั้
งสองสามารถ
ยั
บยั้
งเซลล
มะเร็
งได
ร
อยละ 50 ที่
ความเข
มข
น 102
P
g/ml และ 99
P
g/ml ตามลํ
าดั
บ (Zhao, 2006) ส
วนกลไกการทํ
าลาย
เซลล
มะเร็
งเกิ
ดจากการทํ
าลาย DNA การยั
บยั้
งการแบ
งตั
วของเซลล
มะเร็
งและเหนี่
ยวนํ
าให
เซลล
ตายแบบอะพอพโทซี
ส
(Wang, 2006) นอกจากนั้
นรายงานการวิ
จั
ยที่
ผ
านมายั
งพบอี
กว
าสารสกั
ดจากเปลื
อกลิ้
นจี่
สามารถยั
บยั้
งก
อนมะเร็
งใน
สั
ตว
ทดลองได
อี
กด
วย (Wang
et al
., 2006)
สารสกั
ดจากเมล็
ดลิ้
นจี่
ในช
วงความเข
มข
นที่
ทดสอบคื
อ 17.5-105.0 μg/ml ไม
ได
ทํ
าให
เซลล
เม็
ดเลื
อดขาวปกติ
ลดลงอย
างมี
นั
ยสํ
าคั
ญทางสถิ
ติ
ยกเว
นที่
ความเข
มข
นสู
งสุ
ดที่
ใช
ทดสอบคื
อ 175.0 μg/ml ทํ
าให
เซลล
เม็
ดเลื
อดขาวปกติ
ลดลงอย
างมี
นั
ยสํ
าคั
ญทางสถิ
ติ
(p
<0.05) (ภาพที่
2) ส
วนตั
วทํ
าละลาย DMSO ในช
วงความเข
มข
น 0.1-1.0 % พบว
าไม
มี
ผลต
อจํ
านวนซลล
เม็
ดเลื
อดขาวปกติ
ผลการศึ
กษาครั้
งนี้
แตกต
างจากงานวิ
จั
ยหนึ่
งที่
พบว
าสารสกั
ดที่
ได
จากเปลื
อกลิ้
นจี่
ช
วยปรั
บระบบภู
มิ
คุ
มกั
น โดยสามารถกระตุ
นการเจริ
ญเติ
บโตของเซลล
ม
ามได
ที่
ความเข
มข
น 12.5
P
g/ml (Zhao, 2006)
ทั้
งนี้
อาจเนื่
องมาจากความแตกต
างกั
นขององค
ประกอบจากเปลื
อกและเมล็
ด ระยะเวลา ความเข
มข
นของสารสกั
ด
ชนิ
ดของเซลล
และสภาวะที่
ใช
ในการเลี้
ยงเซลล
การทดสอบความเป
นพิ
ษต
อเซลล
เม็
ดเลื
อดขาวปกติ
ในครั้
งนี้
เป
นข
อมู
ลที่