full2012.pdf - page 130

extract 3 กรัมต่อลิตร Malt extract 5 กรั มต่อลิตร Peptone 5 กรั มต่อลิตร) ปริ มาณ 10 มิ ลลิลิตร เลี้ ยงในสภาพเขย่าความเร็ว
150 รอบต่อนาที บ่มที่ อุณหภูมิ 30 องศาเซลเซี ยส เป็ นเวลา 24 ชั่วโมง จากนั้นนํามาเพิ่มปริ มาณโดยใส่ ลงในฟลาสก์ที่มี
อาหารเลี้ ยงเชื้ อเหลว YM ปริมาตร 100 มิลลิลิ ตร เลี้ยงในสภาพเขย่าความเร็ ว 150 รอบต่อนาที ที่ อุณหภูมิ 30 องศา
เซลเซียส เป็ นเวลา 24 ชั่วโมง นํามาวัดค่าการดูดกลืนแสงที่ ความคลืนที่ 620 นาโนเมตร (OD620) และ ปรับค่า OD620 ให้
เท่ากับ 0.5 ก่อนจะนําไปใช้เป็ นเชื้ อเริ่มต้น การเตรี ยมกล้าเชื้อแบคทีเรี ย Zymomonas mobilis TISTR 550 โดยการถ่ายเชื้ อ
จากหลอด stock ลงในจานอาหารเลี้ ยงเชื้ อที่มีอาหารแข็งสู ตร Zymomonas medium agar บ่มที่อุณหภูมิ 30 องศาเซลเซียส
เป็ นเวลา 24 ชั่วโมง จากนั้ นนํามาเพิ่มปริ มาณโดยเลี้ ยงในฟลาสก์ที่ มีอาหารเลี้ ยงเชื้อเหลว Zymomonas medium (Glucose
20 กรัมต่อลิตร Yeast extract 10 กรัมต่อลิตร Peptone 10 กรัมต่อลิตร) ปริมาตร100 มิลลิลิ ตร เลี้ ยงในสภาพเขย่าความเร็ว
150 รอบต่อนาที ที่ อุณหภูมิ 30 องศาเซลเซี ยส เป็ นเวลา 24 ชั่วโมง นํามาวัดค่าการดูดกลืนแสงที่ความคลื นที่ 620 นาโน
เมตร (OD620) และ ปรับค่า OD620 ให้เท่ากับ 0.5 ก่อนจะนําไปใช้เป็ นเชื้อเริ่ มต้น การเตรี ยมกล้าเชื้อ Enterobacter
aerogenes TISTR 1468 โดยการถ่ายเชื้ อจากหลอด stock ลงในจานอาหารเลี้ยงเชื้ อที่มีอาหารแข็งสู ตร NA บ่มที่อุณหภูมิ
30 องศาเซลเซียส เป็ นเวลา 24 ชั่วโมง จากนั้ นนํามาเพิ่มปริ มาณโดยเลี้ ยงในฟลาสก์ ที่มีอาหารเลี้ ยงเชื้ อ NB (Beef extract 3
กรัมต่อลิตร Peptone 5 กรัมต่อลิตร) ปริ มาตร100 มิลลิลิ ตร เลี้ ยงในสภาพเขย่าความเร็ ว 150 รอบต่อนาที ที่อุณหภูมิ 30
องศาเซลเซี ยส เป็ นเวลา 24 ชั่วโมง นํามาวัดค่าการดูดกลืนแสงที่ ความคลืนที่ 620 นาโนเมตร (OD 620) และ ปรับค่า OD620
ให้เท่ากับ 0.5 ก่อนจะนําไปใช้เป็ นเชื้อเริ่ มต้น
เตรี ยมขยะเศษอาหารจากการย่อยเศษอาหารโดยการย่อยด้วยจุ ลินทรี ย์จากลู กแป้ ง นําขยะเศษอาหารที่ผ่านการ
ย่อยปริมาตร 70 มิ ลลิลิ ตรลงในฟลาสขนาด 100 มิลลิลิ ตร ปรับค่า pH ของของเสี ยเศษอาหารให้ได้ pH 5.5 เติมกล้าเชื้ อ
เริ่ มต้นร้อยละ 10 ของปริ มาตรที่ใช้ในการหมักทําการเพาะเลี้ยงที่ 37 องศาเซลเซี ยส เขย่า 100 รอบต่อนาทีเป็ นเวลา 12
ชั่วโมง และถั งทิ้งไว้ให้เกิ ดการหมั กเป็ นเวลา 120 ชั่ วโมง และ ศึกษาเปรี ยบเที ยบระหว่ างการหมักเดี่ ยวด้วยเชื้ อ
Saccharomyces cerevisiae Zymomonas mobilis Candida shehatae และ Enterobacter aerogenes และการหมักร่วมด้วย
เชื้ อ C. shehatae กับ Z. mobilis (CxZ) C. shehatae กับ E. aerogenes (CxE) C. shehatae กับ S. cerevisiae (CxS) S.
cerevisiae กับ Z. mobilis (SxZ) S. cerevisiae กับ E. aerogenes (SxE) และ Z. mobilis กับ E. aerogenes (ZxE) เก็ บตัวอย่าง
เมื่อเวลาผ่านไป 0 24 48 72 และ 120 ชั่วโมง โดยวัดปริ มาณนํ้ าตาลรี ดิวซ์ , ค่า pH, ปริ มาณเอทานอล และกรดอินทรี ย์ โดย
เครื่ อง High-performance liquid chromatography (HPLC) สภาวะที่ใช้ตามรายงานของ Hniman และคณะ (2011) กรัมเอ
ทานอลต่อกรัมนํ้ าตาลคํานวณจากปริ มาณเอทานอลที่เกิดขึ้ น (กรั มต่อลิตร) ต่อปริ มาณนํ้ าตาลเริ่มต้น (กรัมต่อลิตร) ทําให้
ทราบว่าจากนํ้ าตาล 1 กรั มสามารถเปลี่ยนเป็ นเอทานอลได้กี่ กรัม กรั มเอทานอลต่อกรัมขยะเศษอาหาร คํานวณจากปริ มาณ
เอทานอลที่ เกิดขึ้ น (กรั ม) ต่อปริ มาณขยะเศษอาหาร (กรั ม) ที่ถูกย่อยสลายโดยการย่อยด้วยจุลิ นทรี ย์จากลูกแป้ ง แล้วได้
เป็ นนํ้ าตาลเริ่ มต้น (กรัมต่อลิ ตร) ทําให้ ทราบว่าจากเศษอาหาร 1 กรัม สามารถผลิ ตเป็ นเอทานอลได้กี่ กรัม ค่า Yp/s
คํานวณได้จากการวัดปริ มาณผลิ ตภัณฑ์และการใช้สารตั้ งต้นในช่วงเวลาหนึ่ ง ดังสมการ Yp/s = ǻP/ǻS ค่าอัตราการผลิต
เอทานอลคํานวณได้จาก ปริ มาณเอทานอลที่เกิดขึ้ น (กรั มต่อลิตร) ต่อเวลาที่ใช้ในการผลิตเอทานอล (ชั่วโมง)
Ÿ¨„µ¦ª·‹´¥Â¨³°£·ž¦µ¥Ÿ¨
°Š‡rž¦³„°šµŠÁ‡¤¸Â¨³„µ¥£µ¡ °Š ¥³Á«¬°µ®µ¦
องค์ประกอบทางกายภาพและเคมีของขยะเศษอาหารจากการเก็บตัวอย่างขยะเศษอาหาร 15 ครั้ ง ตลอดเวลา 4
เดือน (มกราคม ถึง เมษายน 2554) จากโรงอาหาร ร้ านอาหาร และตลาดในเขตตําบลบ้านพร้าว อําเภอป่ าพะยอม จังหวัด
พัทลุง จากชุมชุนจากโรงขยะเทศบาลตําบลปากแพรก อําเภอทุ่ งสง จังหวัดนครศรี ธรรมราช ผลการวิเคราะห์ แสดงใน
ตารางที่ 1 ขยะเศษอาหารจากร้านอาหารและโรงอาหารมีองค์ประกอบที่เหมาะสมต่อกระบวนการหมักได้แก่ ค่า pH ของ
130
การประชุมวิชาการระดับชาติ มหาวิ ทยาลัยทักษิณ ครั้งที่ 22 ประจำปี 2555