935
üĉ
íĊ
Öćøüĉ
ÝĆ
÷
ÖćøđÖĘ
ïêĆ
üĂ÷Š
ćÜĒúąÙĆ
éĒ÷ÖđßČĚ
ĂøćßĂïøš
Ăî
đÖĘ
ïêĆ
üĂ÷Š
ćÜđýþĕöš
ǰĔïĕöš
ǰöĊ
øŠ
ĂÜøĂ÷ÖćøëĎ
Ö÷Š
Ă÷ÿúć÷ǰĒúąéĉ
îǰÝćÖïøĉ
đüèïŠ
ĂîĚĞ
ćøš
ĂîÙüîĒÙÜǰÝ êøĆ
ÜǰìĞ
ćÖćøÙĆ
é
Ē÷Öøćēé÷ǰêĆ
éđýþĕöš
ǰĔïĕöš
ǰđðŨ
îßĉĚ
î×îćéǰ0.5×0.5 cm Ēúš
üüćÜïîĂćĀćøǰPotato Dextrose Agar (PDA) ìĊę
đêĉ
ö÷ć
ðäĉ
ßĊ
üîąǰStreptomycin Ùüćöđך
öך
îǰ50 mg/L ïŠ
öìĊę
Ăč
èĀõĎ
öĉ
ǰ45 °C đðŨ
îđüúćǰ5-7ǰüĆ
îǰêĆ
üĂ÷Š
ćÜéĉ
îǰßĆę
ÜêĆ
üĂ÷Š
ćÜǰ25 g
đÝČ
ĂÝćÜĔîÿćøúąúć÷ǰNaCl Ùüćöđך
öך
îǰ0.85 % (w/v) ìĊę
ñŠ
ćîÖćøîċę
ÜÛŠ
ćđßČĚ
ĂĒúš
üǰðøĉ
öćêøǰ225 ml đ×÷Š
ćĔĀš
đך
ćÖĆ
îĕéš
ÙüćöđÝČ
ĂÝćÜìĊę
ǰ10
-1
ǰÝćÖîĆĚ
îìĞ
ćÖćøđÝČ
ĂÝćÜĒïïǰ10ǰđìŠ
ćǰêŠ
ĂđîČę
ĂÜÝîëċ
ÜÙüćöđÝČ
ĂÝćÜìĊę
ǰ10
-6
ǰîĞ
ćĕðǰspread ïîĂćĀćøǰPDA
Ēúš
üïŠ
öìĊę
Ăč
èĀõĎ
öĉ
ǰ45 °C đðŨ
îđüúćǰ5-7ǰüĆ
îǰĒ÷ÖøćìĊę
đÝøĉ
âúÜïîÝćîĂćĀćøǰPDA ìĊę
ĕöŠ
öĊ
Öćøđêĉ
ö÷ćðäĉ
ßĊ
üîąǰĒúąÙĆ
éĒ÷ÖêŠ
Ă
Ýîĕéš
đßČĚ
Ăïøĉ
ÿč
ìíĉĝ
ÖćøìéÿĂïÙüćöÿćöćøëĔîÖćøÿøš
ćÜđĂîĕàöŤ
ǰXylanase
đêøĊ
÷öĂćĀćøĒ×Ę
ÜǰCellulolysis Basal Media (CBM) ðøąÖĂïéš
ü÷ǰXylan đך
öך
îǰ0.1 % (w/v), (NH
4
)
2
SO
4
2 g, KH
2
PO
4
4 g, Na
2
HPO
4
.12H
2
O 15.40 g, MgSO
4
.7H
2
O 0.2 g, Yeast extract 1 g ĒúąǰAgar powder 16 g ĔîîĚĞ
ć
ÖúĆę
îǰ1 L îĞ
ćĕðîċę
ÜÛŠ
ćđßČĚ
ĂǰđìĂćĀćøúÜĔîÝćîđúĊĚ
÷ÜđßČĚ
Ăéš
ü÷üĉ
íĊ
ðúĂéđßČĚ
Ăǰ Aseptic technique) ÷š
ć÷ĕĂēàđúêøćìĊę
ÙĆ
éĒ÷Öĕéš
úÜïîĂćĀćøǰCBM + Xylanǰēé÷Ĕßš
ǰCork borer đÝćąúÜïîēÙēúîĊ
×ĂÜøćïøĉ
đüè×ĂïēÙēúîĊ
ǰĔßš
đ×Ę
öđ×Ċę
÷÷š
ć÷ßĉĚ
îüčš
îĕðüćÜ
ïîÝćîĂćĀćøìĊę
đêøĊ
÷öĕüš
ǰïŠ
öìĊę
Ăč
èĀõĎ
öĉ
ǰ45 °C đðŨ
îđüúćǰ5ǰüĆ
îǰÝćÖîĆĚ
îêøüÝñúÖćø÷Š
Ă÷ÿúć÷ǰXylan ēé÷Öćøǰflood
plate éš
ü÷ǰ0.25 % Iodine đðŨ
îđüúćǰ5ǰîćìĊ
ǰúš
ćÜĂĂÖéš
ü÷îĚĞ
ćÖúĆę
îǰÿĆ
ÜđÖêÖćøđðúĊę
÷îĒðúÜüĉ
đÙøćąĀŤ
ñúéĆ
ÜîĊĚ
ǰ[5]
öĊ
Öćøñúĉ
êđĂîĕàöŤ
ǰXylanase ÝąĔĀš
ÿĊ
đĀúČ
ĂÜǰ
ĕöŠ
öĊ
Öćø÷Š
Ă÷ÿúć÷ǰXylanase ÝąĔĀš
ÿĊ
öŠ
üÜǰĀøČ
ĂîĚĞ
ćđÜĉ
î
=
=
+
-
ÙŠ
ćǰHydrolysis Capacity (HC) ēé÷üĆ
é×îćéüÜĔÿøĂïēÙēúîĊ
×ĂÜøćǰĒúą×îćéēÙēúîĊ
×ĂÜøćǰÙĞ
ćîüèĕéš
êćö
ÿöÖćøéĆ
ÜîĊĚ
ǰ[6]
Hydrolysis Capacity (HC value) =
đÿš
îñŠ
ćîýĎ
î÷Ť
ÖúćÜ×ĂÜüÜĔÿøĂïēÙēúîĊ
×ĂÜøć
ሺୡ୫ሻ
đÿš
îñŠ
ćîýĎ
î÷Ť
ÖúćÜēÙēúîĊ
×ĂÜøć
ሺୡ୫ሻ
ýċ
ÖþćĂč
èĀõĎ
öĉ
ìĊę
đĀöćąÿöêŠ
ĂÖćøđÝøĉ
â×ĂÜøćßĂïøš
Ăîǰ
ÙĆ
éđúČ
ĂÖøćìĊę
öĊ
ÙüćöÿćöćøëĔîÖćøñúĉ
êđĂîĕàöŤ
Xylanase ìĊę
öĊ
ÙŠ
ćǰHCǰêĆĚ
ÜĒêŠ
ǰ1.2 ×ċĚ
îĕðǰđóćąđúĊĚ
÷ÜïîĂćĀćøǰ
PDA ïŠ
öìĊę
Ăč
èĀõĎ
öĉ
ǰ30 35 45 Ēúąǰ55 °C üĆ
é×îćéđÿš
îñŠ
ćîýĎ
î÷Ť
ÖúćÜ×ĂÜēÙēúîĊ
×ĂÜøćßĂïøš
ĂîìĊę
Ăč
èĀõĎ
öĉ
êŠ
ćÜė ìč
Öǰ3 üĆ
î
Öćøüĉ
đÙøćąĀŤ
Öĉ
ÝÖøøöđĂîĕàöŤ
Xylanase
ÙĆ
éđúČ
ĂÖøćìĊę
öĊ
ÙüćöÿćöćøëĔîÖćøñúĉ
êđĂîĕàöŤ
Xylanase ìĊę
öĊ
ÙŠ
ćǰHCǰêĆĚ
ÜĒêŠ
ǰ1.2 ×ċĚ
îĕðđóćąđúĊĚ
÷ÜĔîĂćĀćø CBM
broth ìĊę
Ĕßš
ǰXylanǰđðŨ
îÿĆ
ïÿđêøì ðøĉ
öćêøǰ100ǰml ĔîôúćÿÖŤ
×îćéǰ250ǰml ìĊę
Ùüćöđך
öך
îÿðĂøŤ
×ĂÜøćǰ
6
ǰ– 10
7
spores/ml ïŠ
öìĊę
Ăč
èĀõĎ
öĉ
ǰ45 °C đÖĘ
ïêĆ
üĂ÷Š
ćÜìč
ÖüĆ
îìĊę
ǰ3 6 9 12 15 18 Ēúąǰ21 üĆ
îǰüĉ
đÙøćąĀŤ
Öĉ
ÝÖøøö×ĂÜđĂîĕàöŤ
ēé÷
ĒïŠ
ÜĂćĀćøđúĊĚ
÷ÜđßČĚ
Ăðøĉ
öćêøǰ1 ml ðŦũ
îđĀüĊę
÷ÜìĊę
ÙüćöđøĘ
üǰ5,000 rpmǰĂč
èĀõĎ
öĉ
ǰ4ǰ°C đðŨ
îđüúćǰ5ǰîćìĊ
ǰîĞ
ćÿŠ
üîĔÿìĊę
ðŦũ
îĕéš
ǰ
ðøĉ
öćêøǰ0.5ǰml ĔÿŠ
ÿćøúąúć÷ÿĆ
ïÿđêøì XylanǰìĊę
úąúć÷Ĕîǰ0.1 M Sodium phosphate buffer pH 7) ðøĉ
öćêøǰǰǰǰ
0.5ǰml ïŠ
öìĊę
Ăč
èĀõĎ
öĉ
ǰ50ǰ°C îćîǰ15ǰîćìĊ
ǰĒúš
üđêĉ
ö Dinitrosalicylic acid (DNS)ǰðøĉ
öćêøǰ1 mlǰêš
öĔîîĚĞ
ćđéČ
ĂéđðŨ
îđüúćǰ
5 îćìĊ
ǰÝćÖîĆĚ
îĀ÷č
éðäĉ
Öĉ
øĉ
÷ćÖćøđÖĉ
éÿĊ
éš
ü÷ÖćøĒߊ
îĚĞ
ćĒ×Ę
ÜìĆ
îìĊ
ǰđðŨ
îđüúćǰ5 îćìĊ
ǰĒúš
üðøĆ
ïðøĉ
öćêøĔĀš
ĕéš
ǰ4 ml éš
ü÷îĚĞ
ćÖúĆę
îǰ
